Анализ лекарственного растительного сырья

Соответствие ЛРС и полученным из него продуктам НТД определяется путем проведения фармакогностического анализа. Фармакогностический анализ включает в себя комплекс методов анализа ЛРС и сырья животного происхождения, позволяющий определить подлинность и доброкачественность.

ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ

Подлинность – это соответствие образца наименованию, под которым он поступил на анализ. Например, если на этикетке написано «корень алтея», то следует установить, соответствует ли название подлинности образца. В результате исследования должно быть написано «сырье подлинно» или наоборот.

Чистоту лекарственного сырья определяют по отсутствию недопустимых примесей и подмесей. Допустимые примеси не должны превышать определенных норм, указанных в НТД.

Доброкачественность – характеризуется нормальной , зольностью и достаточным содержанием действующих веществ, отсутствием плесени и вредителей. Доброкачественность сырья зависит от своевременного и правильного проведения сбора и сушки.

Фармакогностический анализ нормативно регулируется документами 2-х типов: с одной стороны – соответствующие общие статьи ГФ ХI, приемки, методы отбора проб, методы определения подлинности и доброкачественности ЛРС, с другой – НД, определяющие требования к конкретному виду сырья.

На анализ сырье может поступать в цельном, резаном, дробленном и порошкообразном виде, в виде таблеток, лекарственных сборов и . Фармакогностический анализ складывается из ряда последовательно проводимых анализов:

макроскопического; микроскопического; биологическим; фитохимического; хроматографическим; товароведческого.

Выбор метода исследования зависит от формы сырья.

Макроскопическим анализом определяют подлинность цельного лекарственного растительного сырья по признакам: внешнему виду, цвету, размерам, а также запаху и вкусу. При исследовании сырье раскладывают на доске или клеенке, осматривают и сравнивают с заведомо подлинным образцом.

Внешний вид. Определяют тип и форму сырья, строение поверхности (простым глазом или под лупой с ув. 10). Размеры. Миллиметровой линейкой делают несколько измерений и по ним заключают о средней величине данного объекта. Мелкие плоды и семена измеряют миллиметровой бумагой по ГОСТу 334—73. Размер шаровидных семян определяют просеиванием через сита с круглыми отверстиями по ГОСТу 214—70. Цвет. Определяют при дневном освещении только сухого сырья. Запах. Хрупкое сырье растирают между пальцами, более твердое скоблят ножом или растирают в ступке; некоторые объекты обливают горячей водой (для лучшего распознавания запаха). Вкус. Пробуют с осторожностью, не проглатывая (ядовитое сырье пробовать нельзя). Вкус листьев, трав, цветков лучше определять в 10%-ном отваре.

Для разных морфологических групп сырья требуются неодинаковые методы исследования. Некоторые признаки определяют на сухом сырье, другие—на размоченном. Подлинность цельного сырья устанавливают путем внешнего осмотра, резаное или порошкообразное сырье рассматривают под микроскопом.

Листья — Folia. Под термином «листья» в понимают высушенные целые листья или их части, т. е. отдельные листочки сложного листа (лист сенны). Тонкие листья в сырье сморщиваются, их необходимо предварительно размочить, погрузив на несколько минут в горячую воду. Затем листья расправляют при помощи пинцета и иглы, чтобы видны были форма листа> край, жилкование, черешок. Мелкие и кожистые листья не размачивают. Обращают внимание на поверхность листа с обеих строи (голая, или опушенная, жилки вдавлены или выступают). Этот признак лучше рассматривать на сухом сырье. Наличие эфирномасличных железок и других образований на поверхности листа, а также вместилищ в мезофилле определяют с помощью лупы (увеличение 10).

Цветки — Flores. Цветки как сырье включают высушенные соцветия, их части и отдельные цветки. Заготовляют обычно распустившиеся цветки. Корзинки сложноцветных (астровых) собирают в начале цветения трубчатых цветков, некоторые виды сырья — в фазу (цветки цитварной полыни). Цветки используют в неизмельченном виде, поэтому для определения подлинности сырья достаточно исследовать внешние признаки. При необходимости сырье рассматривают под микроскопом. Цвет, запах и размеры образца устанавливают на сухом сырье. Для определения строения цветка его размачивают в горячей воде, помещают на предметное стекло и под лупой расчленяют двумя иглами, рассматривая чашечку, венчик, тычинки, пестик.

Трава— Негbа. Травой называют высушенные надземные части травянистых растений, состоящие из листоносных и цветоносных стеблей; в ней присутствуют цветки, а иногда и плоды разной степени развития.

Заготавливают траву по-разному: собирают только верхушки (череда), всю надземную часть, отбрасывая толстые нижние стебли (зверобой), у некоторых трав после обмолота оставляют только цветки и листья (тимьян, чабрец, донник), траву сушеницы топяной вырывают с корнями. В сухих травах определяют длину стебля, диаметр цветка или соцветия, опушенность, цвет, запах; в размоченных травах — форму листа, характер прикрепления листа к стеблю, форму стебля, тип соцветия, строение цветка и тип плода. Форма стебля видна на поперечном разрезе. Листья, цветки и плоды обрывают и измельчают отдельно.

Плоды — Fructus. Плодами называют истинные и ложные плоды, соплодия, сборные (сложные) плоды, а также их части, собранные во время полного созревания. В сухом сырье невооруженным глазом или под лупой (ув. 10) определяют форму плодов и характер поверхности кожуры. Размер мелких плодов, как и семян, устанавливают, раскладывая их в ряд на миллиметровой бумаге. Сочные плоды вначале рассматривают в сухом виде, а затем кипятят или размачивают в горячей воде, определяя форму и особенности строения околоплодника; затем отделяют Семена от мякоти, обмывают и устанавливают их форму (как и при анализе семян), а также подсчитывают число семян в плоде. Иногда плод разрезают поперек и считают количество гнезд и семян в каждом гнезде.

Семена — Semina. Под термином «семена» понимают цельные семена и отдельные семядоли, собранные в, период полного созревания., Цельные семена легко распознают по внешнему виду невооруженным глазом или под лупой (ув. 10). Трудно определяемые семена исследуют под" микроскопом. При установлении подлинности семян рассматривают их форму, поверхность, которая может быть гладкой, бугорчатой или ячеистой, голой или опушенной. Семена состоят из зародыша, кожуры и запасных питательных веществ, иногда диагностическое значение имеют рубчик и семя-шов.

Цвет и запах устанавливают при соскабливании или растирании; размеры мелких семян определяют путем раскладывания их в ряд на миллиметровой бумаге, а шарообразных — путем просеивания через сито с округлыми отверстиями определенного диаметра.

Кора — Cortex. Корой называют наружную часть стволов, ветвей и корней деревьев, кустарников, расположенную к периферии от камбия. Подлинность коры не всегда можно определить по внешнему виду, поэтому для идентификации необходимо микроскопическое исследование. Кора бывает разных размеров, имеет вид трубчатых, желобоватых и плоских кусков или неравномерных обрезков. Снаружи она покрыта бурой или серой пробкой с округлыми или продолговатыми чечевичками, иногда на ней поселяются лишайники. Кустистые лишайники при заготовке коры следует удалять (процент допустимой примеси их указан в соответствующих статьях). Листоватые лишайники при заготовке коры не удаляют и при анализе не учитывают. Кора корней лишена чечевичек и лишайников.

Наружная поверхность коры может быть гладкой либо с продолговатыми или поперечными трещинами. Внутренняя сторона коры более светлая и ровная, поперечный излом неровный, занозистый, щетинистый или зернистый, что зависит от числа и толщины волокон и наличия каменистых клеток. Указывают максимальную толщину коры. Длину и толщину коры измеряют миллиметровой линейкой (ширина не имеет значения).

Цвет определяют с двух сторон, вкус — на сухом сырье. Запах коры усиливается при увлажнении или соскабливании внутренней поверхности.

Корни, корневища—Radices, Rhizomata. Это высушенные подземные органы многолетних травянистых растений, очищенные от отмерших и нестандартных частей и отмытые от земли. Некоторые виды сырья освобождают от пробки, крупные корни и корневища разрезают на части. Подлинность цельных корней и корневищ устанавливают по внешним признакам невооруженным глазом или под лупой (ув. 10). Определяют форму, цвет (на свежем изломе), характер поверхности и излома.

Для исследования измельченного сырья применяют микроскоп.

Микроскопический" анализ основан на определении признаков анатомического строения и обычно применяется для исследования резаного и порошкообразного лекарственного сырья. Цель микроскопического анализа — установить подлинность сырья. Для этого рассматриваемый объект помещают на предметное стекло микроскопа в капле жидкости и накрывают покровным стеклом. Каждый препарат рассматривают сначала при малом увеличении для общей ориентировки, а для детального анализа — при большом увеличении.

Жидкости, применяемые для изготовления микропрепарата, называются включающими. Они имеют разное назначение и делятся на две группы: индифферентные и просветляющие.

Индифферентные жидкости — это вода, глицерин, масло, просветляющие — раствор хлоралгидрата, растворы КОН и NaOH.

Индифферентные жидкости, не реагируя с исследуемым сырьем, служат средой для его рассмотрения. Вода применяется "для ориентировочного исследования, она не изменяет форму и окраску клеток. В воде хорошо просматриваются крахмальные зерна и включения оксалата кальция, но в ней растворяется слизь и распадаются алейроновые зерна, жирное масло собирается в более крупные капли.

По сравнению с водой в глицерине препараты не высыхают и могут сохраняться несколько дней. Он относится к слабопросветляющим жидкостям, так как при его продолжительном воздействии ткани становятся более прозрачными.

Масло применяют для наблюдения растворимых в воде веществ.

Просветляющие жидкости. Их назначение — сделать препарат более прозрачным. Лучшей просветляющей жидкостью является раствор хлоралгидрата. При, его воздействии воздух из препарата вытесняется, крахмальные зерна разбухают и расплываются; жирные и эфирные масла растворяются; белковые вещества, хлорофилл, смолы и другие включения разрушаются; темноокрашенные оболочки светлеют; без изменения остаются включения оксалата кальция. Так как хлоралгидрат действует медленно, препарат рекомендуется осторожно подогреть, но не кипятить.

Фитохимический анализ - используется для качественного и количественного определения действующих веществ с помощью химических, физико-химических и других методов. Фитохимические методы используют часто для определения доброкачественности ЛРС. Для установления подлинности ЛРС используют качественные реакции и хроматографию на основные действующие и сопутствующие вещества, которые изложены в НД на данный вид ЛРС. Фитохимические реакции, применяемые для установления подлинности ЛРС подразделяют на:

Качественные химические реакции, для проведения которых готовят водные или водно-спиртовые извлечения из исследуемого сырья. Эффект наблюдают при добавлении соответствующего реактива к полученному извлечению. Для выполнения этих реакций обычно использют пробирки, часовые или предметные стекла с лунками. Микрохимические реакции ведут одновременно с микроскопическим анализом ЛРС, наблюдая результаты невооруженным глазом и под микроскопом: такое проведение реакции значительно повышает их чувствительность. Например, на предметное стекло помещают извлечение свежего растительного материала, содержащего , а рядом помещают каплю пикриновой кислоты, после чего содержимое обеих капель соединяют тонким каналом, в котором наблюдают образование кристаллов пикратов алкалоидов. В качественных химических реакциях, как правило, необходим контрольный опыт. Гистохимические реакции – реакции, с помощью которых определяют те или иные соединения непосредственно в местах их локализации, то есть на срезах свежего или фиксированного материала. Результаты гистохимических реакций наблюдают под микроскопом вначале при малом, а затем при большом увеличениях. Условием проведения гистохимических реакции является специфичность их, потому в случае присутствия в исследуемом объекте других веществ, дающих подобные результаты реакции, их надо предварительно удалить. Наблюдать результаты реакции надо сразу после ее проведения, пока не произошла исследуемого вещества. Хроматографические методы (в тонком слое сорбента или на бумаге) позволяют не только обнаружить, но и определить качественный состав природных соединений, имеющих диагностическое значение при идентификации определенных видов ЛРС. Есть высокоэффективная хроматография, газовая хроматография, газо-жидкостная хроматография и другие физико-химические хроматографические методы.

Люминесцентный анализ имеет основное достоинство: высокую чувствительность и специфичность; метод можно применять и для изучения толстых непрозрачных срезов сухого ЛРС. Люминесцентный метод можно использовать при изучении извлеченных веществ (в пробирках, на хроматограмме) и непосредственно в местах их локализации в растительных тканях (люминесцентная микроскопия), то есть одновременно определять отдельные группы природных соединений, способных люминесцировать (например, антраценпроизводные, флавоноиды) и анатомическую структуру ЛРС.

Биологический метод анализа. Биологическая активность ЛРС устанавливается на животных (кошках, голубях, лягушках) и выражается в единицах действия. Определение биологической активности всегда проводят в сравнении с образцами (стандартами). Устанавливают наименьшие дозы испытуемого образца сырья, которые вызывают систолическую остановку сердца у подопытных животных. В зависимости от того, на каком животном проводился эксперимент, дозы называют лягушачьими (ЛЕД), кошачьими (КЕД) и голубиными (ГЕД) единицами действия. Затем рассчитывают содержание единиц действия в 1г. сырья. Например, 1г. листьев наперстянки пурпурной содержит 50 – 60 ЛЕД или 10,3 – 12,6 КЕД. В настоящее время этот метод анализа применяется редко.

Товароведческий анализ – это наиболее полный анализ, оценивающий подлинность и доброкачественность ЛРС в соответствии с требованиями НД. Анализ проводят на аптечных складах (базах), на предприятиях по переработке ЛРС или изготавливающих из него лекарственные средства

Товароведческий анализ проводят в 3 этапа

Приёмка партии сырья Отбор проб для анализа Анализ проб

Партия – это количество сырья массой не менее 50 кг одного наименования, однородного, по всем показателям и оформленного одним документом, удостоверяющим его качество.

Документ должен содержать следующие данные:

номер и дату выдачи документа; наименование и адрес отправителя; наименование сырья; номер партии; массу партии; год и месяц сбора или заготовки; район заготовки (для сырья от дикорастущих расте­ний) ; результаты испытаний качества сырья; (проводится в лаборатории отправителя) наименование нормативно-технической документации, регламентирующей качество сырья; подпись лица, ответственного за качество сырья, с ука­занием фамилии и должности.

Каждую единицу продукции подвергают внешнему осмотру для установления соответствия упаковки и маркировки требо­ваниям нормативно-технической документации.

Обращают внимание

на правильность упаковки, состояние тары (отсут­ствие подмочки, подтеков и других повреждений, отрица­тельно влияющих на качество и сохранность сырья).

После осмотра внешнего вида упаковки всех единиц в партии приступают к отбору единиц продукции для анализа.

Для проверки соответствия качества сырья требованиям нормативно-технической документации проводят выборку из неповрежденных единиц продукции, взятых из разных мест партии в количестве, указанном в табл. № 1.

Количество единиц продукции сырья Объем выборки

__________________________________________________________

1 – 5 Все единицы

6 – 50 5 единиц

Свыше 50 10 % единиц продукции,

Составляющей партию

Отобранные единицы продукции вскрывают и путем внешнего осмотра определяют однородность сырья по способу подготовки (цельное, измельченное, прессованное и т. д.), цвету, запаху, засоренности; наличие плесени, гнили, устойчи­вого постороннего запаха, не исчезающего при проветривании;

засоренность и посторонними примесями (камни, стекло, помет грызунов и птиц и т. д.).

Одновре­менно невооруженным глазом и с помощью лупы (х 5—10) определяют наличие амбарных вредителей.

Неполные до 10 единиц продукции приравнивают к 10 единицам (напри­мер, при наличии в партии 51 единицы продукции объем выборки составляет 6 единиц).

При установлении при внешнем осмотре неоднородности сырья, наличия плесени и гнили, засоренности посторонними растениями в количествах, явно превышающих допустимые примеси и т. д. вся партия должна быть рассортирована поставщиком, после чего вторично предъявлена к приемке.

Партия сырья не подлежит приемке при обнаружении в сырье затхлого, устойчивого посторон­него запаха, не исчезающего при проветривании, ядовитых растений и посторонних примесей (помет грызунов и птиц, стекло и др.), зараженности амбарными вредителями II и III степеней.

Проверку качества сырья, в поврежденных единицах продукции производят от­дельно от неповрежденных, вскрывая каждую единицу про­дукции.

Отбор проб.

Точечные пробы. Из каждой единицы продукции, отобранной для вскрытия, берут, избегая измельчения, 3 точечные пробы:

сверху, снизу и из середины.

Из мешков, тюков и кип точеч­ные пробы отбирают на глубине не менее 10 см рукой сверху, затем, после распарывания по шву, из середины и снизу; то­чечные пробы семян и сухих плодов отбирают зерновым щу­пом.

Из сырья, упакованного в ящик, первую точечную пробу отбирают из верхнего слоя, вторую — после удаления сырья примерно до половины ящика и третью — со дна ящи­ка.

Масса точечных проб не регламентируется, но они должны быть примерно одинаковыми по массе.

Из всех точечных проб, которые складываются на товароведческой доске или на столе с бортиками, осторожно перемешивая, со­ставляют объединенную пробу.

Объединенная проба –это совокупность всех точечных проб, отобранных из партии ЛРС и тщательно (но осторожно) перемешанных между собой.

Масса объединенной пробы неопределенна и зависит от величины партии, особенностей сырья, величины точечных проб и т. д.

Все последующие пробы, необходимые для проведения различных ис­пытаний, выделяют методом квартования.

Для установления степени зараженности амбарными вре­дителями из объединенной пробы методом квартования вы­деляют пробу массой 500 г для мелких видов сырья и массой 1000 г — для крупных видов сырья.

Эту пробу помещают в плотно закрывающуюся банку, в которую вкладывают эти­кетку.

Из объединенной пробы выделяют также пробы для определения содержания радионуклидов (масса 500-1000 г) и микробиологической чистоты.

Из объединенной пробы методом квартования выделяют среднюю пробу.

Суть метода квартова­ния состоит в том, что сырье разравнивают на столе или товароведческой доске в виде квадрата по возможности тонким равномерным по толщине слоем и по диагонали делят на 4 треугольника.

Два противоположных треугольника сырья удаляют, а 2 оставшихся соединяют вместе, осторожно перемешивают и вновь разравнивают в виде квадрата.

Эту операцию повторяют до тех пор, пока не останет­ся количество сырья в двух противоположных треугольниках, соответствующее массе средней пробы, указанной в табл. 2, ГФ х1, т.1, стр.270..

Остатки объединенной пробы сырья присоединяют к партии. Допустимые отклонения в массе средней пробы не должны превышать ±10%.

Среднюю пробу упаковывают в полиэтиленовый или много­слойный бумажный мешок. К мешку прикрепляют этикетку, такую же этикетку вкладывают внутрь мешка. На этикетке указывают следующие данные:

наименование сырья; наиме­нование поставщика; номер партии; массу партии; дату отбора пробы; фамилию и должность лица, отобравшего пробу.

Аналитические пробы

Аналитической пробой называют часть анализируемой средней пробы, частично отражающей качество сырья предложенной партии.

Из средней пробы методом квартования выделяют аналитические пробы для определения:

1 ан. Проба – подлинности, измельченности и содержания примесей;

2 ан. Проба – влажности (аналитическую пробу для определения влажности отделяют сразу же после отбора средней пробы и упаковывают герметично);

3 ан. Проба - содержания золы и действующих веществ.

Вредители лекарственного растительного сырья и борьба с ними

В процессе транспортирования и при неправильном хранении лекарст­венное сырье, как и другое растительное, может подвергаться порче амбар­ными вредителями. Чаще всего порче подвержено сырье, богатое полисахаридами (крахмалом, инулином), сочные плоды, богатые сахарами, некото­рые сухие плоды и семена, богатые жирным маслом.

Амбарные вредители ухудшают качество сырья, способствуют его само­согреванию, загрязняют сырье, тару, хранилища, оборудование, транспорт­ные средства. К амбарным вредителям относятся клещи, долгоносики, то­чильщики, моль, грызуны.

Большой вред сырью, таре, помещениям для хранения наносят крысы и мыши. Они заражают и загрязняют многие виды сырья, особенно плоды можжевельника и плоды зонтичных.

Меры борьбы с вредителями лекарственного сырья могут быть предуп­редительные и истребительные.

К предупредительным мерам относятся под­готовка, очистка и обеззараживание складских помещений, перерабатываю­щих предприятий, машин, механизмов, соблюдение санитарно-гигиенических правил хранения лекарственного сырья;

к истребительным — физико-механические и химические средства дезинсекции.

Дезинсекцию проводят с помощью сероуглерода (реже хлорпикрина).

Зараженное сырье помещают в таре в герметически закрывающееся помещение. В разных местах кабины на штабелях с сырьем расставляют плоские чашки, в которые наливают сероуглерод.

Дверь быстро закрывают, щели замазывают алебастром. В га­зовой среде сырье выдерживают от 2 (летом) до 7 (зимой) дней. По истечении этого времени камеру открывают и дают газу улетучиться. Сероугле­род огнеопасен, в связи с чем работа с ним требует особой осторожности.

В летний период для дезинсекции можно использовать солнечную радиа­цию. Сырье, которое не теряет внешнего вида под воздействием солнечных лучей, помещают на темные подстилки и прогревают в течение нескольких часов.

Дератизацию помещений проводят общеизвестными способами. Весьма эффективны для дератизации ловчие бочки.

Мероприятия по борьбе с амбарными вредителями должны быть ком­плексными с соблюдением мер личной и противопожарной безопасности.

Определяют степень зараженности лекарственного растительного сырья амбарными вредителями.

Исследование на наличие амбарных вредителей осуществляют в обязательном порядке при приемке лекарственного расти­тельного сырья, а также ежегодно при хранении. Метод определения степе­ни зараженности сырья амбарными вредителями изложен в ГФ XI (т. 1, с. 276) и ГОСТ 24027.1—80.

Проба для установления степени зараженности вредителями выделяется методом квартования из объединенной пробы мас­сой 500 г для мелких видов сырья и массой 1000 г для крупных видов сырья [ГФ XI (т. 1, с. 269) и ГОСТ 24027.0-80].

При анализе определяют степень зараженности по наличию клещей и других насекомых в пересчете на 1 кг сырья.

Аналитическую пробу просеивают сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В сырье, прошедшем сквозь сито, проверяют наличие клещей (лупа х5—10), моли, точильщика и их личинок, живых и мертвых насекомых, подсчитывают их число в сырье, оставшемся на сите.

Различают три степени зараженности сырья вредителями:

I степень — в 1 кг сырья не более 20 клещей или не более 5 насекомых; II степень — более 20 клещей, свободно передвигающихся по поверхности сырья и не образу­ющих сплошных масс, или 6—10 экземпляров моли, точильщика и их личинок; III степень — клещи образуют сплошные войлочные массы, дви­жение их затруднено, или более 10 экземпляров насекомых в сырье (моль, точильщик, их личинки и др.).

Сырье, зараженное вредителями, после дезинсекции просеивают сквозь сито с отверстиями 0,5 мм (при зараженности клещами) или 3 мм (при зараженности другими вредителями).

После обработки сырье I степени зараженности вредителями может быть допущено к медицинскому применению.

При II степени и в исключитель­ных случаях при III степени зараженности сырье может быть использовано для переработки с целью получения индивидуальных веществ, в остальных случаях сырье уничтожают.

Приемщиками, закупщиками растительного лекарственно-технического сырья являются:

1. Министерство здравоохранения РФ, которое закупает сырье в специализированных сельскохозяйственных предприятиях.

2. Аптекоуправления, которые через районные и сельские аптеки закупают сырье для удовлетворения собственных потребностей.

3. Различные организации, предприниматели, которые закупают сырье у сборщиков и поставляют потребителям.

Приемные пункты, предприниматели и аптеки закупают сырье непосредственно от сборщиков. Оно при приемке подлежит 100%-му осмотру. Для этого доставленное сырье рассыпают тонким слоем на чистый брезент или полотную бумагу и подвергают товароведческому анализу в хорошо освещенном месте.

Товароведческий анализ проводят для определения подлинности, чистоты и доброкачественности сырья. В зависимости от агрегатного состояния (цельное, изрезанное, порошкообразное) и целевого назначения лекарственное сырье исследуют (анализируют) макроскопическим, микроскопическим, фитохимическим, биологическим, хроматографическим, люминесцентно-микроскопическим и другими методами.

Подлинностью (идентичностью) называют соответствие исследуемого образца сырья наименованию, под которым он поступил для анализа. Устанавливают ее макро- и микроскопическим методами.

Чистота лекарственного сырья определяется отсутствием недопустимых и наличием допустимых примесей в пределах установленных норм. Определяют ее товароведческим анализом.

Доброкачественность сырья зависит от многих факторов. Прежде всего она определяется правильностью и своевременностью сбора, сушки, отсутствием плесени и вредителей, нормальной влажностью, зольностью и содержанием биологически активных веществ, которые определяют товароведческим анализом. Для выявления отдельных показателей качества (отсутствия вредителей, допустимого процента измельченности и др.) применяют специальные методы исследования. Без данных товароведческого анализа сырье не может быть признано качественным и использовано по назначению.

Полный товароведческий анализ сырья очень сложный и в аптеках не проводится. Его осуществляют в межрайонных конторах и центральных районных аптеках, на базах и складах при первичной приемке больших партий сырья, по истечении сроков хранения, при подозрении на потерю должного качества в случае подмоченности, засорения, увлажнения, повышенной измельченности.

В соответствии с действующими НТД товароведческий анализ лекарственно-технического сырья проводят в три этапа: 1 – приемка сырья, 2 – отбор проб и 3 – анализ выделенных проб.

Приемку лекарственно-технического растительного сырья начинают со знакомства с сопроводительными документами и с внешнего осмотра всей поступившей партии сырья.

В аптеке сырье поступает мелкими партиями по нескольку килограммов в одной упаковке. На склады и базы поступают крупные партии сырья массой не менее 50 кг, состоящие из кип, мешков, ящиков и других упаковок.

При внешнем осмотре партии сырья обращают внимание на правильность маркировки, сохранность (целостность) тары, отсутствие подмочки, подтеков, поломок, пробоев и других повреждений, влияющих на качество и сохранность сырья. Единицы продукции с поврежденной тарой отделяют и качество сырья в них проверяют отдельно.

Для проверки качества сырья из партии с неповрежденными единицами упаковки продукции делают выборку. Единицы упаковки продукции отбирают из различных мест партии. Объем выборки зависит от величины партии. Так, если в партии продукции от 1 до 5 единиц упаковки, то в выборку включают все единицы, от 6 до 50 единиц упаковки – 5 единиц, более 50 единиц упаковки – 10% единиц продукции от всей партии.

Если при внешнем осмотре обнаружено неоднородное сырье, частично тронутое плесенью и гнилью, то вся партия должна быть рассортирована и только после этого вторично предъявлена к сдаче. Для этого вновь делают выборку и результаты проверки становятся окончательными.

Если при вскрытии отобранных для проверки качества единиц продукции обнаружены устойчивый затхлый запах, не исчезающий при длительном проветривании; посторонний запах, не свойственный данному виду сырья; отсутствие запаха, характерного для данного вида сырья; ядовитые растения; загрязненность сырья (стекло, камни, помет грызунов, птиц и др.); загрязненность амбарными вредителями II и III степени, то такая партия сырья приемке не подлежит.

Попавшие в выборку единицы упаковки продукции вскрывают и путем внешнего осмотра определяют однородность сырья по цвету, запаху и засоренности; наличие плесени, гнили; устойчивого постороннего запаха, не исчезающего при проветривании; присутствие ядовитых растений, посторонних примесей (камни, стекло и др.) и амбарных вредителей (с помощью лупы с увеличением в 5-10 крат).

От каждой единицы упаковки продукции, попавшей в выборку, отбирают по 3 точечные пробы: сверху, снизу и из середины. Из крупных единиц упаковки продукции (кипы, тюки) пробы берут на глубине 10 см. Пробы семян и сухих плодов извлекают зерновым щупом. Из ящиков первую точечную пробу отбирают с поверхности, вторую – после удаления сырья примерно до половины ящика, а третью со дна ящика. Пробы извлекают осторожно, чтобы не увеличить измельченность. Смесь всех точечных проб, отобранных из анализируемых тарных мест, образует объединенную пробу, из которой методом квартования находят среднюю пробу.

Средняя проба – часть объединенной пробы, отбираемая для проведения полого товароведческого анализа, т.е. по всем показателям. Масса средней пробы для каждого вида сырья указана в соответствующем стандарте и составляет для сочных плодов 200 г, сухих плодов – 300 г, листьев – 400 г, трав и подземных органов растений – 600 г и т.д.

Для формирования средней пробы сырье на столе разравнивают в виде квадрата с толщиной слоя не менее 3 см и по диагонали делят на четыре треугольника. Из двух противоположных треугольников сырье удаляют. Из двух оставшихся треугольников сырье вновь разравнивают в виде квадрата, делят по диагонали на четыре треугольника и удаляют сырье из двух противоположных треугольников. Такие операции продолжаются до тех пор, пока количество сырья, оставшегося в двух треугольниках, не станет соответствовать массе средней пробы, приведенной в стандарте. Отклонения в массе средней пробы не должны превышать ±10%.

Среднюю пробу сырья упаковывают в полиэтиленовый мешок (если сырье не содержит эфирное масло) или в многослойный бумажный пакет и прикрепляют этикетку с указанием поставщика сырья, массы и даты поступления партии. Из средней пробы методом квартования выделяют три аналитические пробы для определения измельченности и содержания примесей, влажности, содержания золы и действующих веществ.

Аналитической пробой называют часть средней пробы, выделенной для проведения конкретного анализа. После выделения пробы для определения измельченности и содержания примесей оставшуюся часть средней пробы крупных видов сырья (трава, корни, корневища и им подобные) режут ножницами или секатором на крупные куски, тщательно перемешивают и выделяют аналитические пробы для определения влажности, содержания золы и действующих веществ. Масса аналитических проб должна соответствовать нормам, предусмотренным в нормативно-технических документах. Аналитическую пробу, предназначенную для определения влажности сырья, немедленно помещают в герметически закрывающуюся банку.

Исследования лекарственно-технического растительного сырья проводят в соответствии с требованиями действующих НТД. В зависимости от агрегатного состояния сырья (цельное или измельченное) его начинают с макроскопического или микроскопического анализа, а иногда – с определения измельченности сырья.

Макроскопическим анализом устанавливают подлинность цельного сырья по морфологическим признакам: внешнему виду, цвету, размерам, запаху и вкусу. Для исследования сырье раскладывают на доске (клеенке) внимательно осматривают и сравнивают с эталонными образцами.

Внешний вид сырья исследуют невооруженным глазом или под лупой с увеличением 10 раз (определяют тип и форму сырья, строение поверхности). Он должен соответствовать ботаническому описанию растения с теми изменениями, которые возникают при сушке. Размеры сырья измеряют миллиметровой линейкой. Делают несколько измерений и по ним устанавливают среднюю величину объекта. Мелкие плоды и семена измеряют миллиметровой бумагой, раскладывая их рядами в одну линию. Размер шаровидных семян и плодов определяют путем просеивания через сита с круглыми отверстиями, предусмотренными НТД.

Цвет семян определяют при дневном рассеянном освещении. Цвет высушенного сырья может полностью соответствовать свежему (не высушенному) сырью, например, цвет корней, корневищ, почек, коры, цветов бессмертника, травы сушеницы болотной. Чаще всего цвет сырья в процессе сушки в большей или меньшей степени изменяется, но при правильной сушке эти изменения незначительны. Так, травы и листья должны оставаться зелеными с темными или светлыми оттенками или приобрести сероватый оттенок. Окрас цветов может стать несколько более блеклым. Белые цветы приобретают желтые или сероватые оттенки. Незначительно изменяется при сушке цвет ягод малины, шиповника и других.

Запах сырья при правильной сушке сохраняется, а в некоторых случаях усиливается. У отдельных видов сырья нет запаха или он очень слабый. Это следует учитывать при определении подлинности продукта. Запах в сухих растениях определяют путем растирания их между пальцами. Твердое сырье (кора, корни и т.п.) нужно поскоблить ножом или измельчить в ступке. Отдельные растения лучше выделяют запах при смачивании водой. Запах должен быть свойственный растению данного вида, не затхлый, не кислый, не прогорклый.

Вкус служит дополнительным признаком для отдельных видов сырья. В большинстве случаев это малопоказательный признак, но для ягод вкус является показателем вида и качества сырья. Лекарственное сырье следует пробовать с осторожностью, мелкими кусочками и, пожевав, не проглатывать, а тотчас выплюнуть, так как может оказаться ядовитым. Ядовитое сырье пробовать нельзя. Вкус листьев, трав, цветков лучше определять в 10%-ном отваре.

Макроскопический анализ проводят всегда при приемке сырья на базах, складах, в аптеках и других пунктах. В зависимости от морфологической группы сырья при исследовании особое внимание обращают на различные признаки.

Кора – наружная часть стволов, ветвей и корней деревьев, кустарников, расположенная к периферии от камбия. Подлинность ее не всегда можно определить по внешнему виду, поэтому для идентификации необходимо микроскопическое исследование. При макроскопическом исследовании определяют толщину и форму кусков, особенности наружной и внутренней поверхности коры (наличие чечевичек, бороздок) и характер излома (неровный, занозистый, щетинистый или зернистый). Цвет коры определяют с двух сторон, вкус – на сухом сырье. Запах коры усиливается при увлажнении или соскабливании внутренней поверхности. При соскабливании наружной поверхности у некоторых видов сырья обнажается слой другого цвета. Кора корней лишена чечевичек и лишайников.

Цветы используют в неизмельченном виде, поэтому для определения подлинности сырья достаточно исследовать внешние признаки. При необходимости сырье рассматривают под микроскопом. Цвет, запах и размеры цветов устанавливают на сухом сырье. Для определения строения цветка его размачивают в горячей воде, помещают на стекло, расчленяют двумя иглами под лупой и рассматривают чашечку, венчик, тычинки, пестик.

Листья целые или их части (отдельные листочки сложного листа) при сушке сморщиваются, поэтому для анализа их предварительно размачивают, погрузив на несколько минут в горячую воду, затем на стекле или светлой клеенке расправляют при помощи пинцета и иглы, чтобы были видны форма листа, край, жилкование, черешок. Мелкие и кожистые листья не размачивают. Рассматривают поверхность листа с обеих сторон и выясняют, она голая или опушенная, жилки вдавлены или вступают, характер жилкования, наличие железок. Наличие эфирномасличных железок и других образований на поверхности листа, а также вместилищ в мезофилле определяют с помощью лупы с 10-кратным увеличением.

Травы – надземные части травянистых растений – состоят из листоносных и цветоносных стеблей. В них присутствуют цветки, иногда и плоды разной степени развития. Для установления подлинности в сухих травах определяют длину стебля, диаметр цветка или соцветия, опушенность, цвет, запах; в размоченных травах – форму листа, характер листорасположения, форму стебля, тип соцветия, строение цветка и тип плода. Форму стебля рассматривают на поперечном разрезе. Листья, цветки и плоды обрывают и исследуют отдельно.

Семена цельные, отдельные семядоли легко распознать по внешнему виду невооруженным глазом или под лупой с 10-кратным увеличением. Трудно определяемые семена исследуют под микроскопом. Для установления подлинности семян определяют их форму, поверхность, которая может быть гладкой, бугорчатой или ячеистой, голой или опушенной. В необходимых случаях в семенах рассматривают зародыши, кожуру, запасные питательные вещества. Диагностическое значение иногда имеют рубчик и семяшов. Цвет и запах семян устанавливают при соскабливании или растирании. Размеры мелких семян определяют путем раскладывания их в ряд на миллиметровой бумаге, а шарообразных – путем просеивания через сито с круглыми отверстиями, установленными НТД.

Плоды истинные и ложные, соплодия, сборные (сложные) плоды и их части исследуют невооруженным глазом или под лупой (х10). Определяют форму плодов и характер поверхности кожуры. Размер мелких плодов определяют так же, как и семян. Сочные плоды вначале рассматривают в сухом виде, а затем кипятят или размачивают в горячей воде и определяют форму и особенности строения околоплодника. Затем отделяют семена от мякоти, обмывают и устанавливают их форму, а также подсчитывают число семян в плоде. Иногда плод разрезают поперек и считают количество гнезд и семян в каждом гнезде.

Подлинность целых корней, корневищ и клубней устанавливают по внешним признакам невооруженным глазом или под лупой с 10-кратным увеличением. Измельченное сырье исследуют под микроскопом. Выясняют тип подземного органа, его форму, размеры, способ обработки, цвет наружной поверхности и на изломе. На неочищенной поверхности обращают внимание на продольные и поперечные морщинки, остатки и следы листьев. Выявляют характер поверхности на свежем изломе (ровный, волокнистый или другой).

Микроскопический анализ основан на определении признаков анатомического строения и чаще применяется для исследования резанного и порошкообразного сырья. Для исследования образец (пробу) анализируемого объекта помещают на предметное стекло в капле жидкости, накрывают покровным стеклом и рассматривают сначала при малом увеличении микроскопа для общей ориентировки, а для детального анализа – при большом увеличении.

Жидкости, применяемые для изготовления микропрепарата, называют включающими и делят их на индифферентные и просветляющие. Индифферентные жидкости – это вода, глицерин, масло. Они не реагируют с исследуемым сырьем, служат средой для его рассмотрения. Вода применяется для ориентировочного исследования. Она не изменяет форму и окраску клеток. В воде хорошо просматриваются крахмальные зерна и включения оксалата кальция, но в ней растворяется слизь и распадаются алейроновые зерна, а жирное масло собирается в более крупные капли. В глицерине препараты не высыхают и могут сохраняться несколько дней, а при продолжительном воздействии ткани становятся прозрачнее, поэтому глицерин относят к слабо-просветляющим жидкостям. Масло применяют для исследования веществ, растворимых в воде.

Просветляющие жидкости применяют для того, чтобы сделать препарат более прозрачным. Лучшей просветляющей жидкостью считают раствор хлоралгидрата. При воздействии хлоралгидрата воздух из препарата вытесняется, крахмальные зерна разбухают и расплываются; жирные и эфирные масла растворяются; белковые вещества, хлорофилл, смолы и другие включения разрушаются; темноокрашенные оболочки светлеют; без изменения остаются включения оксалата кальция. Для ускорения действия хлоралгидрата (он действует медленно) рекомендуют препарат осторожно подогреть, но не кипятить.

Действие растворов КОН и NаОН в концентрациях от 5 до 15% сходно с действием хлоралгидрата: крахмальные зерна разбухают и быстрее превращаются в клейстер, жиры при нагревании омыляются.

Жидкости, вступающие в химические реакции, помогают установить присутствие определенных веществ в рассматриваемом объекте.

Реактив на крахмал (раствор Люголя) дает сине-фиолетовое окрашивание с крахмалом, которое при хранении выцветает и слабо окрашивает.

Реактив на жирные и эфирные масла (судан III) при легком нагревании капли масел окрашиваются в желто-красный цвет; так же, но несколько медленнее, окрашиваются смолы, кутикула, млечные сосуды и пробка.

Реактивов на слизь несколько:

1. Смесь черной туши (1 часть) и воды (9 частей). Готовят ее по мере надобности. Исследуемый порошок размещают в 1-2 каплях этой туши. На темно-сером поле зрения между неясно различимыми частичками порошка белыми островками выделяются стекловидные бесструктурные комки слизи. Они постепенно набухают и растекаются, растворяясь в воде. Пузырьки воздуха могут дать похожую картину, однако они окружены резким черным контуром, в то время как комки слизи матовые и края их расплывчаты.

2. Метиленовый синий – окрашивает слизь в голубой цвет.

3. Раствор КОН – окрашивает слизь в желтый цвет.

Реактивы на клетчатку:

1. Хлорцинкйод – окрашивает клетчатку в фиолетовый цвет.

2. Аммиачный раствор окиси меди. Клетчатка в этом растворе медленно набухает и растворяется. Кутикула остается нерастворенной.

Реактивы на одревесневшие клетки:

1. Флороглюцин с хлористоводородной кислотой – окрашивает одревесневшие клетки в красный цвет. Реакцию проводят на часовом стекле: срез смачивают 1%-ным спиртовым раствором флороглюцина, а через несколько минут, когда срез пропитается, прибавляют крепкую дымящую хлористоводородную кислоту. Покраснение видно невооруженным глазом.

2. Анилина сульфата раствор – окрашивает одревесневшие ткани в зеленовато-желтый цвет.

Реактив на инулин. Соскоб сухого корня или порошок из него смачивают 20%-ным спиртовым раствором α-нафтола и концентрированной серной кислотой, и он окрашивается в фиолетово-розовый цвет. При замене α-нафтола резорцином проба приобретает красный цвет, а при замене – тимолом – розово-малиновый.

Зараженность сырья вредителями (рис. 35) определяют трижды:

1) – при внешнем осмотре в единице продукции, попавшей в выборку;

2) – при определении измельченности сырья в результате его просева;

3) – при определении примесей – после отсева измельченных частей.

Степень зараженности сырья вредителями устанавливают по количеству насекомых в 1 кг выборки. Для клещей установлены такие нормативы: I степень зараженности – в 1 кг сырья не более 20 насекомых; II степень – более 20 клещей, свободно передвигающихся по поверхности сырья и не образующих сплошных масс; III степень – много клещей, образующих сплошные массы и движение их затруднено.

Для амбарной моли и хлебного точильщика при I степени зараженности в 1 кг сырья должно быть не более 5 вредителей, при II степени – от 6 до 10 вредителей, при III степени – более 10 вредителей.

Рисунок 35 – Амбарные вредители лекарственного растительного сырья:

А – амбарный долгоносик и его личинка; Б – хлебный точильщик и его личинка;

В – хлебная, или амбарная, моль и ее личинка; Г – мучной клещ

При первой степени поражения, после удаления вредителей, сырье допускают для продажи в аптеках. При второй степени зараженности сырье можно использовать только для приготовления препаратов. При третьей степени поражения вредителями сырье используют на заводах для извлечения чистых биологически активных веществ или его сжигают, если на заводе не используют.

Измельченность сырья определяют путем просева пробы через сито с отверстиями, указанными в НТД на данный вид продукции. Пробу помещают в сито и просеивают вращательными движениями. Если проба не помещается на сите, то ее просеивают порциями. Все измельченное сырье взвешивают и вычисляют процентное соотношение его к массе аналитической пробы.

Содержание примесей устанавливают после отсева измельченного сырья и определяют вредителей. Содержимое сита высыпают на доску или клеенку и отбирают все примеси, не соответствующие наименованию рассматриваемого вида сырья и взвешивают каждый вид примесей отдельно с погрешностью не более 0,1 г. Затем содержание каждого вида примеси в процентах (x ) вычисляют по формуле:

x = (m 1 · 100) / m 2 ,

где m 1 – масса примеси (г); m 2 – масса аналитической пробы (г).

Стандарты допускают определенный процент примесей для каждого вида сырья как органические (части того же растения или примеси других растений: сено, солома, прутья), так и минеральные (пыль, песок, земля, камешки, стекло).

Примеси подразделяют на допустимые и недопустимые. К недопустимым примесям относят ядовитые растения металлические предметы, стекло, помет грызунов и птиц. Не допускаются примеси другого вида сырья, т.к. они могут обладать противоположными действиями. Например, к плодам жостера слабительного не допускается примесь плодов черемухи, оказывающих вяжущее действие и наоборот. К траве термопсиса недопустима примесь плодов термопсиса, так как химический состав и применение их неодинаковы (Кузнецова, 1987).

Влажность сырья устанавливают путем высушивания аналитической пробы до абсолютно сухого состояния (после испарения гигроскопической влаги и летучих веществ). Влажность сырья (х , %) вычисляют по формуле:

x = (m – m 1) · 100) / m ,

где m – масса сырья до высушивания, г; m 1 – масса сырья после высушивания, г.

Содержание золы в растительном сырье определяют по массе несгораемых веществ, оставшихся после сжигания и прокаливания сырья. Золу подразделяют на общую, слагающуюся из минеральных примесей (земля, песок, камешки, пыль), и золу, не растворимую в 10%-ной HCl (хлористоводородной кислоте), представляющую собой остаток после обработки общей золы хлористоводородной кислотой и состоящую главным образом из кремнезема.

x 1 = m 1 · 100 ·100 / m2 · (100 – W) ,

где m 1 – масса золы, г; m 2 – масса сырья, г; W – потеря в массе при высушивании, %.

x 2 = (m 1 – m) ·100 · 100) / m 2 · (100 – W) ,

где m 1 – масса золы, г; m – масса золы фильтра, г; m 2 – масса сырья, г; W – потеря в массе при высушивании, % (Кузнецова, 1987).

Для определения содержания биологически активных веществ проводят еще фитохимический, биологический, люминесцентный и хроматографический анализы в соответствии с требованиями специальных НТД. Выполняют подобные анализы в лабораториях крупных пунктов концентрации сырья.

В процессе определения качества сырья обращают внимание на наличие тех или иных пороков (отклонения от нормы). В зависимости от причин происхождения их можно объединить в группы пороков, возникающих в период роста растения, зависящие от сроков и времени сбора сырья, связанные с несоблюдением правил сбора, образующиеся при первичной обработке и сушке сырья, связанные с нарушением условий хранения и транспортирования товара.

Растительное лекарственно-технической сырье относят в брак, если в нем обнаружены:

Устойчивый затхлый запах, не исчезающий при проветривании;

Посторонний запах, не свойственный данному виду сырья;

Отсутствие запаха, свойственного данному виду сырья;

Наличие плесени и гнили;

Примесь посторонних ядовитых растений;

Примесь посторонних неядовитых растений, наличие которых затрудняет или делает невозможным использование сырья по назначению;

Загрязненность сырья посторонними предметами (камни, железо, бумага, стекло и прочие), которые нельзя отнести к числу нормальных органических примесей;

Поврежденность грызунами и наличие помета грызунов и птиц;

Зараженность сырья амбарными вредителями.

Лекарственное сырьё и полученные из него продукты представляют собой полноценный материал в том случае, если они по всем параметрам соответствуют действующим НД. Это соответствие определяется путём проведения фармакогностического анализа.

Под фармакогностическим анализом имеется в виду комплекс методов анализа сырья растительного и животного происхождения, позволяющих определить подлинность и доброкачественность.

Подлинность - это соответствие исследуемого объекта наименованию, под которым он поступил на анализ.

Доброкачественность - соответствие лекарственного сырья требованиям НД.

Фармакогностический анализ нормативно регулируется документами двух типов: с одной стороны - соответствующие общие статьи ГФ XI, нормирующие правила приёмки, методы отбора проб, методы определения подлинности и доброкачественности лекарственного растительного сырья, с другой - НД, определяющие требования к конкретному виду сырья.

Фармакогностический анализ складывается из ряда последовательно проводимых анализов: макроскопического, микроскопического, фитохимического и товароведческого. В некоторых случаях он дополняется определением биологической активности сырья.

Подлинность сырья, как правило, устанавливается путём макроскопического и микроскопического анализов, реже используются элементы фитохимического анализа путём проведения качественных реакций на наличие в сырье тех или иных групп соединений. Доброкачественность определяется на основе данных товароведческого и фитохимического анализов и, если необходимо, путём установления биологической активности сырья.

Товароведческий анализ включает правила приёмки сырья, регламентирует отбор проб для проведения последующих испытаний сырья на содержание примесей, степени измельчённости, заражённости вредителями, содержания влаги, золы, действующих веществ и т.д.

Макроскопический анализ состоит в определении морфологических (внешних) признаков испытуемого сырья визуально - невооруженным глазом или с помощью лупы, а также определении размеров, цвета, запаха сырья и вкуса (для неядовитых объектов!). Общие правила макроскопического анализа для установления подлинности приведены в статьях ГФ XI «Листья» (вып. 1, с. 252), «Травы» (вып. 1, с. 256), «Цветки» (вып. 1, с. 257), «Плоды» (вып. 1, с. 258), «Семена» (вып. 1, с. 260), «Кора» (вып. 1, с. 261), «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы» (вып. 1, с. 263). Полученные в результате такого анализа данные сравнивают с данными, приведёнными в разделе «Внешние признаки» НД на анализируемый вид сырья. Макроскопический анализ наиболее надёжен при определении подлинности цельного сырья.

Как сказано, подлинность устанавливается также и на основании микроскопического анализа . Он применяется при анализе цельного, измельчённого, порошкованного, резано-прессованного, брикетированного сырья. Этот вид анализа приобретает особое значение в четырёх последних случаях. Анализ основан на выявлении анатомических диагностических признаков с помощью микроскопа. Техника микроскопического (включая люминесцентную микроскопию и гистохимические реакции) исследования подробно изложена в общих статьях ГФ XI, перечисленных выше, а также на с. 277-282 ГФ XI, вып. 1.

Практически во всех НД на отдельные виды сырья в настоящее время имеются данные, характеризующие анатомические диагностические признаки. В статьях ГФ XI они выделены в раздел «Микроскопия», в ГОСТах включены в раздел «Методы испытаний».

Доброкачественность сырья определяется путём товароведческого и фитохимического анализов. В ходе товароведческого анализа определяют числовые показатели: содержание влаги - ГФ XI (вып. 1, с. 285); золы - ГФ XI (вып. 2, с. 24); дубильных веществ - ГФ XI (вып. 1, с. 286); эфирного масла - ГФ XI (вып. 1, с. 290); экстрактивных веществ - ГФ XI (вып. 1, с. 295); степень заражённости сырья амбарными вредителями - ГФ XI (вып. 1, с. 276); измельчённость, допустимые примеси (ГФ XI, вып. 1, с. 275).

Фитохимический анализ - вид анализа, используемого для качественного и количественного определения действующих веществ с помощью химических и физико-химических методов. Эти методы отчасти описаны в ГФ XI (вып. 1, с. 95 и 159), отчасти (конкретные методы определения) в статьях ГФ XI на виды лекарственного растительного сырья (ГФ XI, вып. 2) или в других НД (ФС, ФСП, ГОСТ, ОСТ, ТУ).

Определение измельчённости

При определении измельчённости аналитическую пробу помещают на сито, указанное в соответствующем НД на данный вид лекарственного сырья, и осторожно, плавными вращательными движениями просеивают, не допуская дополнительного измельчения. Просеивание измельчённых частей считается законченным, если количество сырья, прошедшего сквозь сито при дополнительном просеве в течение 1 мин, составляет менее 1 % сырья, остающегося на сите.

Для цельного сырья частицы, прошедшие сквозь сито, взвешивают и вычисляют их процентное содержание к массе аналитической пробы.

Для просеивания резаного, измельчённого, дробленого, порошкованного сырья берут два сита. Пробу сырья помещают на верхнее сито и просеивают. Затем отдельно взвешивают сырьё, оставшееся на верхнем сите и прошедшее сквозь нижнее сито, и вычисляют процентное содержание частиц, не прошедших сквозь верхнее сито, и содержание частиц, прошедших сквозь нижнее сито, к массе аналитической пробы. Взвешивание проводят с погрешностью ±0,1 г при массе аналитической пробы свыше 100 г и ±0,05 г при массе аналитической пробы 100 г и менее.

Допустимая норма содержания измельчённых частиц для каждого вида сырья указана в соответствующем НД.

Определение содержания примесей

Оставшуюся часть аналитической пробы после отсева измельчённых частиц (для цельного сырья) или сход с верхнего сита (для измельчённого, дробленого сырья) помещают на чистую гладкую поверхность и лопаточкой или пинцетом выделяют примеси, указанные в НД на лекарственное растительное сырьё. Обычно к примесям относят:

· части сырья, утратившие окраску, присущую данному виду (побуревшие, почерневшие, выцветшие и т.д.);

· другие части этого растения, не соответствующие описанию сырья;

· органическую примесь (части других неядовитых растений);

· минеральную примесь (земля, песок, камешки).

Одновременно обращают внимание на наличие амбарных вредителей.

Каждый вид примеси взвешивают отдельно с той же погрешностью, как и при определении измельчённости. Содержание каждого вида примеси (X) в процентах вычисляют по формуле:

где m 1 - масса примеси, г; m 2 - масса аналитической пробы сырья, г.

Вредители лекарственного растительного сырья и борьба с ними

В процессе транспортирования и при неправильном хранении лекарственное растительное сырьё может подвергаться порче амбарными вредителями. Чаще всего порче подвержено сырьё, богатое полисахаридами (крахмалом, инулином), сочные плоды, богатые сахарами, некоторые сухие плоды и семена, богатые жирным маслом.

Амбарные вредители ухудшают качество сырья, способствуют его самосогреванию, загрязняют сырьё, тару, хранилища, оборудование, транспортные средства.

К амбарным вредителям относятся клещи, долгоносики, точильщики, моль (рис. 3).

Рис. 3. Вредители лекарственного растительного сырья:

1 – амбарный долгоносик и его личинка; 2 – хлебный точильщик и его личинка; 3 – хлебная, или амбарная, моль и ее личинка; 4 – мучной клещ.

Большой вред сырью, таре, помещениям для хранения наносят крысы и мыши. Они заражают и загрязняют многие виды сырья, особенно плоды можжевельника и плоды зонтичных.

Меры борьбы с вредителями лекарственного сырья могут быть предупредительные и истребительные. К предупредительным мерам относятся: подготовка, очистка и обеззараживание складских помещений, перерабатывающих предприятий, машин, механизмов, соблюдение санитарно-гигиенических правил хранения лекарственного сырья.

К истребительным мерам относятся физико-механические и химические средства дезинсекции. Дезинсекцию проводят с помощью сероуглерода (реже хлорпикрина). Заражённое сырьё помещают в таре в герметически закрывающееся помещение. В разных местах кабины на штабелях с сырьём расставляют плоские чашки, в которые наливают сероуглерод. Дверь быстро закрывают, щели замазывают алебастром или заклеивают. В газовой среде сырьё выдерживают от 2 (летом) до 7 (зимой) дней. По истечении этого времени камеру открывают и дают газу улетучиться. Сероуглерод огнеопасен, в связи с чем работа с ним требует особой осторожности. В летний период для дезинсекции можно использовать солнечную радиацию. Виды сырья, которые не теряют внешнего вида под воздействием солнечных лучей, помещают на темные подстилки и прогревают в течение нескольких часов.

Дератизацию помещений проводят общеизвестными способами. Весьма эффективны для целей дератизации ловчие бочки.

Мероприятия по борьбе с амбарными вредителями проводятся комплексно с соблюдением мер личной, общественной и противопожарной безопасности.

Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья амбарными вредителями

Исследование на наличие амбарных вредителей проводят в обязательном порядке при приёмке лекарственного растительного сырья, а также ежегодно при хранении. Метод определения степени заражённости сырья амбарными вредителями изложен в ГФ XI (вып. 1, с. 276). Проба для установления степени заражённости вредителями выделяется методом квартования из объединённой пробы массой 500 г для мелких видов сырья и массой 1000 г для крупных видов сырья (ОФС 42-0013-03).

При анализе определяют степень заражённости по наличию клещей и насекомых в пересчёте на 1 кг сырья.

Аналитическую пробу просеивают сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В сырье, прошедшем сквозь сито, проверяют наличие клещей (лупа ×5-10), в сырье, оставшемся на сите, - моли, точильщика, долгоносика и их личинок, живых и мёртвых насекомых.

Различают три степени заражённости вредителями: I степень - в 1 кг сырья не более 20 клещей или не более 5 насекомых; II степень - более 20 клещей, свободно передвигающихся по поверхности сырья и не образующих сплошных масс, или 6-10 экземпляров моли, точильщика и их личинок и др.; III степень - клещи образуют сплошные войлочные массы, движение их затруднено, или более 10 экземпляров насекомых в сырье (моль, точильщик, их личинки и др.).

Сырьё, заражённое вредителями, после дезинсекции просеивают сквозь сито с отверстиями 0,5 мм (при заражённости клещами) или 3 мм (при заражённости другими вредителями).

После обработки сырьё при I степени заражённости вредителями может быть допущено к медицинскому применению. При II степени и в исключительных случаях при III степени заражённости сырьё может быть использовано для переработки с целью получения индивидуальных веществ, в остальных случаях сырьё уничтожают.

Лекарственные средства, в том числе лекарственное растительное сырье, применяемое в медицинской практике, должны отвечать всем современным требованиям безопасности для человека и быть эффективными для лечения различных заболеваний.

Для обеспечения высокого качества сырья необходимо правильно выбрать район и место его произрастания с учетом экологических и экономических факторов (растение должно иметь промышленные запасы, его заготовка должна быть оправдана с экономической точки зрения, а также занимать площадь, неиспользуемую для пастбищ и земледелия, а для культивируемых видов район культуры. Регламентируются сроки сбора сырья и его приемы, характер первичной его обработки, условия сушки, сортировки и упаковка.

Эти условия на каждый вид сырья описаны в единых для всех заготовителей нормативных документах "Инструкции по сбору и сушке лекарственного растительного сырья", которые имеют силу закона.

Условия, обеспечивающие качество лекарственного растительного сырья - это нормы, обеспечивающие определение подлинности, чистоты и доброкачественности сырья. Они регламентируются стандартом и определяются при проведении полного товароведческого анализа конкретного вида сырья .

О доброкачественности и подлинности сырья судят по макроскопии, микроскопии, влажности, зольности, количественного содержания действующих веществ, тяжелых металлов, радионуклидов, а также по данным микробиологической чистоты .

Макроскопия (внешние признаки) является важнейшим показателем подлинности и чистоты сырья. При описании данного показателя указывается состав сырья, т.е. чем представлено сырье (листья, стебель, корни и т.д.); характерные морфологические признаки цельного, резаного или порошкованного сырья, его запах и вкус (для не ядовитых видов), а также размеры.

Микроскопия. Данный показатель содержит диагностические признаки анатомического строения сырья (для некоторых видов приводится люминесцентная микроскопия), вид микропрепарата, на котором проводится исследование, и относится к важнейшему методу определения подлинности лекарственного сырья.

Идентификация сырья. В этом разделе приводятся качественные (идентификации химических веществ с помощью специфичных реагентов) реакции на действующие вещества, спектральные данные (ИК-, УФ-спектры), данные различных методов хроматографии (ТСХ, БХ, ГХ, ГЖХ, ВЭЖХ) с использованием при этом стандартных образцов, методики и условия выполнения эксперимента. Использование тех или иных методов анализа определяется достаточностью определения подлинности вида лекарственного растительного сырья.

Числовые показатели. В этот раздел включены специфические показатели и их нормы - для цельного, резаного или порошкованного сырья, которые являются стандартом для всех видов лекарственного растительного сырья и определяют его качество: содержание действующих или экстрактивных веществ, золы общей и золы, нерастворимой в 10 % растворе хлористоводородной кислоты, примесей и измельченности.

Степень измельчения. ЛРС измельчается до определенной степени в соответствии с частными статьями ГФ РК. Как правило, листья и трава измельчаются до 7 мм; стебли, корни, корневища, кора - в основном до 7 мм; плоды и семена - до 0,5 мм; цветки не измельчаются. Основное правило - измельчать сырье без остатка. Здесь подразумевается то, что нужно брать такое количество сырья и измельчать его, которое требуется для приготовления лекарственного препарата (ЛП), т.к. при последующем хранении измельченное сырье потеряет свои лечебные свойства.

Влажность - один из важнейших показателей доброкачественности ЛРС, влияющий как на состояние сырья, так и на содержание в нем действующих веществ. Под влажностью понимают потерю в массе сырья за счет удаления гигроскопической влаги и летучих веществ, которую определяют при высушивании сырья до постоянной массы.

Летучие вещества представлены преимущественно компонентами эфирных масел, а также некоторыми другими соединениями, которые при температуре определения (100-105°С) переходят в газообразное состояние и улетучиваются из ЛРС.

Зола - один из основных показателей доброкачественности ЛРС, под которым понимают несгораемый остаток минеральных веществ после сжигания навески ЛРС и последующего ее прокаливания до постоянной массы. Количество золы в растительном сырье колеблется в определенных пределах и зависит как от специфики самого сырья, так и способа его сбора и условий сушки. В золе чаще всего содержатся следующие элементы: К, Na, Mg, Са, Fe, С, Si, Р, реже и в меньшем количестве Сu, Mn, Al и др. Эти элементы находятся в золе в виде оксидов или солей угольной, фосфорной, серной и других кислот.

Зола бывает:

Зола общая - это сумма минеральных веществ, которые первоначально содержались в производящем растении, и минеральных веществ, которые попали в сырье из окружающей среды (пыль, песок, земля и т.д.).

Зола, нерастворимая в 10% растворе хлороводородной кислоты - это, как правило, кремния оксид, который образовался из минеральных веществ, свойственных как производящему растению, так и попавших в ЛРС из окружающей среды (пыль).

Зола сульфатная (сульфатные шлаки) - это показатель для определения примесей, включающих органические соединения металлов, нерастворимых в воде .

Также проводят определение степени зараженности сырья амбарными вредителями.

Исследования на наличие амбарных вредителей проводят в обязательном порядке при приемке лекарственного растительного сырья, а также ежегодно при хранении.

Сырье проверяют на наличие живых и мертвых вредителей невооруженным глазом или с помощью лупы при пяти-десятикратном увеличении при внешнем осмотре, а также при определении измельченности и содержания примесей.

Если были обнаружены вредители, то в специальной пробе устанавливают степень заражения. Для этого пробу сырья просеивают сквозь сито с диаметром отверстий 0,5 мм и в отсеве проверяют наличие клещей.

Различают 3 степени заражения клещами и другими амбарными вредителями в пересчете на 1 кг ЛРС.

При наличии клещей выделяют:

1 степень - до 20 клещей;

2 степень - больше 20, но они свободно передвигаются по сырью;

3 степень - больше 20, клещи образуют сплошные войлочные массы.

Возможность дальнейшего использования ЛРС, зараженного амбарными вредителями, определяется степенью зараженности и видом сырья.

Количественное определение. Приводится методика количественного определения основных действующих веществ в виде суммарного содержания (сумма веществ), в пересчете на какое-либо вещество, содержащееся в данном сырье .

Кроме этого сырье должно пройти радионуклидный контроль и анализ на содержание тяжелых металлов, микробиологическую чистоту.

Лекарственные растения не относятся к основным источникам поступления ксенобиотиков (ксенобиотики - условная категория для обозначения чужеродных для живых организмов химических веществ, естественно не входящих в биотический круговорот) в организм человека. Однако необходимо учитывать специфику кумуляции в лекарственном растительном сырье, как отдельных радионуклидов, так и суммарную удельную активность, потому что некоторые лекарственные растения способны накапливать определенное количество радионуклидов, которые в последующем переходят в человеческий организм по экологической цепочке "почва - лекарственное растительное сырье - лекарственная форма - человек".

Радиоактивные изотопы, находящиеся в почве, как правило, переходят в корневые системы растений точно так же, как и стабильные изотопы тех же элементов. В случае сходства химических свойств стабильных и радиоактивных элементов они поступают в растение в исходных пропорциях.

Попадая из почвы в лекарственное растение, радиоактивные элементы в зависимости от своих химических свойств проникают в наземные части или задерживаются в корневой системе .

В настоящее время отечественная и зарубежная HТД не регламентирует требования по предельному содержанию радиоксенобиотиков в лекарственном растительном сырье. Отсутствие точно установленных закономерностей процесса перехода и накопления радионуклидов в лекарственном растительном сырье затрудняет разработку предельно допустимых уровней и ведение контроля за качеством продукции.

До недавнего времени систематические данные об уровнях радиоактивности и радионуклидном составе лекарственных растений и их сырья были представлены в единичных работах. Авария на Чернобыльской АЭС, случившаяся 26 апреля 1986 г., а также многолетние ядерные испытания на Семипалатинском полигоне явились причиной систематизации подобных сведений, нашедших свое отражение в концепции защиты населения и хозяйственной деятельности на территориях, подвергшихся радиоактивному загрязнению. В последнем случае лекарственные растения могут рассматриваться, с одной стороны, как биогенные индикаторы радиоэкологической обстановки территории, подвергшейся радиоактивному загрязнению в результате ядерных взрывов, а с другой стороны - как объекты эколого-гигиенического регламентирования, требующие несколько иного подхода по сравнению с нормированием пищевого и водного факторов.

Современные экологические условия приводят к накоплению в лекарственных растениях различных экотоксикантов. Экологические исследования лекарственных растений начались в 60-е годы прошлого века в Германии. Именно в них было установлено, что содержание токсичных веществ в лекарственном растительном сырье может достигать более высоких концентраций, чем в пищевых продуктах, что и послужило причиной изучения этой проблемы в разных странах.

В настоящее время тяжелые металлы обнаруживаются практически во всех элементах биосферы, а поступление их в организм человека может нанести вред здоровью. В окружающую среду большое количество токсичных металлов поступает вследствие сжигания угля и нефти, использования удобрений, а также со сточными водами. В растения тяжелые металлы поступают из почв и атмосферы в результате пылевого загрязнения. Из почвы поступают Cd, Cu, Zn, которые аккумулируются в тканях растений; Pb преимущественно оседает на поверхности листьев, цветков, плодов, в меньшей степени - стеблей.

В почвы тяжелые металлы могут поступать со сточными водами (Zn, Cr, Pb, Hg и в меньшей степени Cd). Тяжелые металлы обладают неодинаковой способностью к накоплению в растениях, например, легко поглощаются Cd, Zn, по сравнению с ними Cu поглощается в меньшей степени; Mn, Ni поглощаются слабо; труднодоступны растениям Fe и др. элементы. Поэтому проблема содержания тяжелых металлов в лекарственном растительном сырье привлекает внимание исследователей во всем мире .

Определение качества фитопрепаратов имеет свои особенности. Это обусловлено, прежде всего, тем, что химический состав таких препаратов, как правило, достаточно сложный, и активные компоненты зачастую неизвестны. Кроме того, многие из них нестабильны, а сырье имеет естественное происхождение и в химическом отношении непостоянно.

Например, зверобой продырявленный (Hypericum perforatum) имеет широкое применение в фитотерапии - в первую очередь благодаря своему успокаивающему и антидепрессантному действию. Содержит целый ряд веществ, которые содействуют его фармакологическому эффекту. При применении зверобоя или препаратов с его содержанием могут появиться признаки фитотоксичности, особенно при взаимодействии с другими лекарственными средствами (например, индинавир, дигоксин, теофилин, варфарин, циклоспорин, пароксети и т.д.) .

На аптечные склады, базы и промышленные фармацевтические предпри­ятия ЛРС, как правило, поступает в больших количествах. При этом, в зависи­мости от характера предварительной переработки и дальнейшего назначения, разделяют партии («ангро») и серии ЛРС.

Партия ЛРС («ангро») - определенное количество цельного, обмоло­ченного, прессованного ЛРС, однородное по способу подготовки и показателям качества, одного наименования и оформленного одним документом, удостове­ряющим его качество, предназначенное для производства промышленных се­рий фасованной продукции в упаковке «ангро» и в потребительской упаковке.

Серия ЛРС - определенное количество однородного по всем показате­лям фасованного ЛРС (цельное, измельченное, порошок), произведенное в те­чение одного технологического цикла, оформленного одним документом каче­ства. Серия формируется из одной или нескольких (не не более трех) партий ЛРС.

Фасованная продукция - определенное количество (масса) ЛРС цельно­го, измельченного или порошка, помещенного в потребительскую упаковку, предназначенное для приготовления настоев и отваров, или в упаковку «ангро», предназначенную для изготовления лекарственных средств (настоек, экстрак­тов и др.).

Товароведческий анализ партий и серий ЛРС проводит контрольно-аналитическая лаборатория фармацевтического предприятия или лаборатория регионального Центра сертификации и контроля качества лекарственных средств. Лаборатория, проводящая анализ ЛРС на соответствие требований нормативных документов, утвержденных Министерством здравоохранения России, должна иметь соответствующую аккредитацию.

Товароведческий анализ ЛРС, поступающего как «ангро», так и фасован­ного и состоит из нескольких этапов.

Отбор проб;

Испытания (анализ) отобранных проб на соответствие требованиям НД;

Заключение о качестве ЛРС.

ОТБОР ПРОБ

Отбор проб ЛРС для проведения анализа проводится в соответствии с требованиями ОФС 42-0013-03. При этом, необходимо соблюдать действую­щие санитарно - гигиенические правила и условия, исключающие загрязнение ЛРС и обеспечивающие безопасность людей.

Отбор проб для проведения качества лекарственных средств, в том числе и ЛРС, проводится в присутствии специальной комиссии . Процедура отбора проб должна быть зафиксирована всоответствующих документах.

Так, персонал, проводящий отбор проб, должен иметь соответствующую квалификацию.

В частности персонал, занятый отбором проб обязан:

владеть техническими приемами и оборудованием для отбора проб. Для от­бора проб необходимо иметь в распоряжении

все инструменты, которые мо­гут потребоваться для вскрытия упаковок (ящиков, мешков и т.п.) и контей­неров (ножи, клещи, пилы, молотки, гаечные ключи, щетки для удаления пыли и т.д.),

а также материалы для повторного запечатывания упаковок;

(клейкая лента, самоклеящиеся этикетки, на которых указывается, что часть содержимого из упаковки была изъята). Все инструменты и приспособления должны содержаться в чистоте.

Знать о риске перекрестной контаминации.

Знать о мерах предосторожности и их соблюдении в отношении ядовитого и сильнодействующего ЛРС.

Знать о важности визуального контроля исходного сырья, материалов, тары и этикеток.

Знать о важности протоколирования любых непредвиденных или необычных обстоятельств.

Знать о соблюдении правил личной гигиены. В частности, при отборе проб запрещается принимать пищу, пить, курить, а также хранить еду, средства для курения в специальной одежде или месте для отбора проб.

Персонал, за­нятый отбором проб ЛРС, должен строго соблюдать инструкции, регламен­тирующие состояние здоровья и требования личной гигиены, а также носить технологическую одежду.

Отбор проб представляет собой совокупность ряда операций для взятия

определенного количества образцов ЛРС:

Приемка ЛРС;

Выборка единиц продукции;

Маркировка образцов и документальное оформление отбора проб. При этом, необходимо учитывать не только цели отбора проб и вид ана­лиза, но и специфику отбираемых образцов.

Приемка лекарственного растительного сырья

ЛРС как «ангро», так и фасованное, поступает на аптечный склад, базу или промышленное предприятие в упакованном виде. При этом, различают 2 вида упаковки:

Транспортная упаковка ЛРС (единица продукции) - упаковка, представ­ляющая один из видов транспортной тары, указанных в частных фармако­пейных статьях (мешки тканевые и бумажные, пакеты бумажные, тюки, ки­пы, ящики фанерные и картонные и т.д.).

Потребительская упаковка ЛРС - упаковка лекарственного средства, по­ступающая к потребителю, обеспечивающая его сохранность и неизмен­ность свойств в течение установленного срока годности.

Каждая партия (серия) ЛРС сопровождается документом установленного образца (накладной). Сопровождающий документ, как правило, содержит сле­дующие данные:

Номер и дата выдачи документа;

Наименование и адрес поставщика;

Наименование сырья;

Номер партии (серии);

Масса партии (серии);

Год и месяц заготовки;

Район заготовки (для дикорастущих видов)

Результаты испытаний (аналитический паспорт)

НД на сырье

Подпись лица, ответственного за качество сырья с указанием фамилии и должности.

При приемке партии или серии ЛРС, проводятвнешний осмотр поступивших единиц продукции.

Внешнему осмотру подвергают каждую из поступивших транспортных упаковок.

Обращают внимание на:

Качество и целостность тары (отсутствие подмочки, подтеков и других по­вреждений);

Правильность маркировки и ее соответствие действующей НД.

Если при внешнем осмотре обнаружены повреждения тары, то дальней­шую проверку качества сырья, содержащегося в поврежденных единицах про­дукции, производят отдельно. При этом, вскрывают каждую единицу продук­ции идают отдельное заключение о качестве сырья.

Выборка единиц продукции и отбор проб ЛРС

Выборка - совокупность единиц продукции (транспортных упаковок или упаковок «ангро»), отобранных для проведения анализа из партии ЛРС или се­рии фасованной продукции.

Каждую партию (серию) ЛРС рассматривают как отдельную в отношении отбора проб.

Во избежание ошибок не допускается одновременно отбирать пробы от двух партий (серий) и/или двух наименований ЛРС.

Пробы отбирают в количестве, необходимом для проведения трех анали­зов, включая арбитражный.

Каждая из отобранных проб оформляется этикеткой установленного образца.

При получении сомнительных результатов анализа допускается дополнительный отбор проб для повторного анализа.

Процедура отбора проб документально оформляется записью в специаль­ном журнале и актом отбора проб.

Арбитражные образцы ЛРС хранят в специ­ально отведенном помещении в течение всего срока годности.

Выборка единиц продукции и отбор проб партии ЛРС («ангро»)

Приемку ЛРС «ангро» осуществляют партиями.

Выборку поступивших неповрежденных единиц продукции, производят методом случайного или сис­тематического отбора, в количестве, указанном в ОФС 42-0013-03 (таблица 1).

Так, если

От 1 до 5, то в выборку попадают все поступившие транспортные упаковки;

Количество единиц продукции в партии составляет от 6 до 50, то объем вы­борки составляет 5 транспортных упаковок;

Количество единиц продукции в партии более 50, объем выборки составляет 10% общего количества поступившие транспортные упаковки.

Примечание . Если поступает неполный десяток единиц продукции, то его считают за полный.

Например, выборка составляет 7 единиц продукции как от поступивших 68 транспортных упаковок, так и 61 транспортной упа­ковки.

Все единицы продукции, попавшие в выборку вскрывают и проводят

внешний осмотр ЛРС невооруженным глазом или с помощью лупы 5-10 х.

При этом проверяют:

Однородность сырья по способу подготовки (цельное, обмолоченное, прессо­ванное);

Однородность по цвету и запаху;

Засоренность посторонними примесями;

Наличие амбарных вредителей (определяют при помощи лупы 5-10 х).

В результате внешнего осмотра возможны 3 варианта.

1. В ЛРС обнаружены затхлый, устойчивый посторонний запах , не исчезаю­щий при проветривании,примесь ядовитых растений или их частей,помет грызунов и птиц, стекло, а также установленоналичие амбарных вредителей в количествах, соответствующих II и III степеням зараженности.

В этом случае партия ЛРС бракуется полностью и дальнейшей приемке и анализу не подлежит. Создается специальная комиссия и составляется

акт забраковки сырья,

о чем сообщается поставщику.

2. Установлено, что ЛРС неоднородно, присутствуют плесень и гниль, имеется засоренность посторонними неядовитыми растениями в количествах, явно превышающих допустимые нормы.

В этом случае партия ЛРС рассортировывается и каждая ее часть прини­мается повторно.

Если результаты внешнего осмотра части рассортирован­ной партии совпадут с первичными результатами, данная часть партии бра­куется и дальнейшей приемке не подлежит.

3. ЛРС однородно по способу подготовки, цвету и запаху, посторонние приме­си и амбарные вредители отсутствуют или имеются в небольших количест­вах.

В этом случае ЛРС из единиц продукции, попавших в выборку, использу­ется для дальнейшего отбора проб.

ЛРС, удовлетворяющее всем требованиям, которые предъявляются к не­му при внешнем осмотре вскрытых единиц продукции, используют для отбора проб.

Из каждой единицы продукции, попавшей в выборку,берут по 3 точеч­ные пробы.

Точечная проба - минимальное количество пробы, отобранное из каж­дой единицы продукции в установленном порядке за один прием для составле­ния объединенной пробы.

Масса точечных проб не регламентируются, но, по возможности, они должны быть одинаковыми.

Точечные пробы отбирают рукой (если сырье крупное) или зерновым щупом (если сырье - мелкие семена или плоды).

В зависимости от вида тары точечные пробы отбирают по-разному.

Из мешков, тюков и кип - точечные пробы отбирают на глубине не менее 10 см.

Вначале сверху, затем распарывают по шву и берут пробы из середины и снизу. Распоротую тару зашивают.

Из ящиков - первую точечную пробу берут из верхнего слоя, затем сырье выкладывают до половины и из середины берут вторую точечную пробу, после чего сырье выкладывают полностью и со дна ящика берут третью точечную пробу.

После отбора проб сырье укладывают обратно и ящик заколачивают.

Иногда для взятия третьей точечной пробы используют другой вариант: после отбора второй точечной пробы сырье укладывают в ящик, который заколачи­вают, переворачивают, вскрывают дно и отбирают третью точечную пробу.

Все отобранные точечные пробы осторожно перемешивают и получают объединенную пробу.

Объединенная проба - совокупность точечных проб, предназначенная для выделения средней пробы.

Масса объединенной пробы не регламентирует­ся НД и зависит от количества поступивших единиц продукции (партии ЛРС).

Если масса объединенной пробы недостаточна для проведения требуемых ис­пытаний, отбор точечных проб повторяют.

Из объединенной пробы в установленной последовательности отбирают 4 специальные пробы:

Проба для установления степени зараженности сырья амбарными вре­дителями.

Масса этой пробы составляет 500 г для мелких видов ЛРС и 1000 г - для крупных. Пробу герметично упаковывают в стеклянную банку.

Средняя проба. Используется для последующего отбора аналитических проб. Масса средней пробы регламентируется ОФС 42-0013-03 (таблица 2) и зависит от морфологической группы (травы, листья, цветки, корни и т.д.), способу подготовки (свежее или высушенное, цельное или резаное и т.п.).

В ряде случаев, как исключение, масса средней пробы зависит от вида сырья (например, листья сенны, цветки ромашки аптечной, плоды шиповника,

корневища лапчатки и т.д.).

Пробу упаковывают в полиэтиленовый или многослойный бумажный пакет.

3. Проба для определения микробиологической чистоты. Масса пробы со­ставляет 50 - 200 г. Пробу упаковывают в полиэтиленовый или многослой­ный бумажный пакет.

4. Проба для определения радионуклидов. Масса пробы составляет, в соот­ветствии с ОФС 42-0013-03 (таблица 4), 600 г (для листьев, трав, цветков и сборов) или 1000 г (для плодов, семян, кор, корней, корневищ и прочих ви­дов сырья). Пробу упаковывают в полиэтиленовый или многослойный бу­мажный пакет. Анализ ЛРС на содержание радионуклидов проводят в соот­ветствии с требованиями ОФС 42-0011-03.

Для отбора перечисленных проб из объединенной пробы используют

метод квартования, который заключается в следующем.

Сырье осторожно перемешивают, раскладывают ровным слоем в форме квадрата на гладкой чис­той ровной поверхности. Делят на 4 треугольника по диагонали, 2 противопо­ложных треугольника отбрасывают, остальные два, объединяют, осторожно пе­ремешивают и повторяют эти операции до тех пор, пока масса отбираемой про­бы не будет соответствовать требуемой величине.

Каждая из проб, отбираемая из объединенной пробы, может иметь откло­нение по массе ±10% и

оформляется двумя этикетками

(одна из которых при­крепляется снаружи,

другая - вкладывается внутрь упаковки).

На этикетках указывают

Наименование сырья,

наименование поставщика,

номер партии,

мас­са партии,

дата отбора пробы,

а также координаты лица, отобравшего пробу (ФИО, должность и подпись).

ЛРС, которое осталось от объединенной пробы после отбора рассмотрен­ных проб, присоединяют к партии.

Из средней пробы методом квартования выделяют 3 аналитические пробы.

Каждая из аналитических проб имеет свое строгое назначение:

Аналитическая проба № 1 используется для определения подлинности, из-мельченности и содержания примесей.

Аналитическая проба № 2 используется для определения влажности. Эту пробу упаковывают герметично.

Аналитическая проба № 3 используется для определения содержания золы и действующих веществ.

При отборе аналитических проб необходимо учитывать особенности морфологической группы и способа подготовки ЛРС.

Так, если на анализ поступает ЛРС измельченное или оно представленоплодами и семенами,

то сначала выделяют вторую аналитическую пробу для определения влажности сырья и только после этого - аналитические пробы №№ 1 и 3.

Если же ЛРС представлено цельной травой, корнями, корневищами, клубнями , то сначала выделяют аналитическую пробу № 1,

затем сырье из­мельчают ножницами или секаторами и отбирают аналитические пробы №№ 2 и 3.

Массы аналитических проб, как и масса средней пробы, регламентирова­ны НД (таблица 3 ОФС 42-0013-03) и зависят от морфологической группы ЛРС, способу его подготовки, и, в ряде случаев, от вида сырья.

Массы аналитических проб не равны. Самой большой является аналити­ческая проба № 1.

При взвешивании аналитических проб допускаются погрешность, которая зависит от массы пробы:

Если при выделении аналитических проб масса в двух противоположных треугольников окажется меньше или больше, указанной в НД, то допускается добавлять или убирать ЛРС из двух других треугольников, отделяя его по всей толщине слоя.

Исключение из общих правил составляют корни женьшеня, для которых отбор проб осуществляется в соответствии с частной фармакопейной статьей (ГФ XI, т. 2).

Приемка фасованного лекарственного сырья и сборов

ЛРС и сборы, независимо от способа подготовки (цельное, измельченное, порошок, резано-прессованное, брикеты, сигареты), поступают в обращение в потребительских упаковках.

При этом, ЛРС расфасовывают в различные потре­бительские упаковки:

Бумажные (картонные) пачки;

Полиэтиленовые пакеты;

Пакеты из полипропилена;

Фильтр-пакеты и др.

Фасованное лекарственное сырье принимаютсериями.

Приемка серии фасованного сырья в целом аналогична приемке партии ЛРС, поступающего «ангро» и состоит из тех же стадий.

Отбор проб фасованного ЛРС представляет собой совокупность ряда операций для взятия определенного количества образцов ЛРС:

Выборка единиц продукции;

Непосредственный отбор проб ЛРС.

Выборка транспортных упаковок фасованного сырья

Выборка единиц продукции и отбор проб для фасованного сырья имеет ряд отличий от ЛРС, поступающего «ангро».

Сырье, расфасованное в потребительские упаковки, поступает в транс­портных единицах (единицах продукции), чаще всего ящиках.

Выборку поступивших неповрежденных единиц продукции, производят методом случайного или систематического отбора.

Объем выборки единиц продукции при приемке фасованного ЛРС регламентируется ОФС 42-0013-03 (таблица 5) и зависит от количества поступивших транспортных упаковок.

Так, если

Количество единиц продукции в партии составляет от 1 до 5 , то в выборку попадаютвсе поступившие транспортные упаковки;

Количество единиц продукции в партии составляет от 6 до 150 , то объем вы­борки составляет5 транспортных упаковок;

Количество единиц продукции в партии - от 151 до 500 , объем выборки со­ставляет10 транспортных упаковок;

Количество единиц продукции в партии более 501 транспортной упаковки, объем выборки рассчитывают по формуле:Х = 0.4 х п ,

где п - количество транспортных упаковок.

Полученное дробное число округляют в сторону увеличения до целого числа. При этом, количество упаковочных единиц в одной серии должно находиться в переделах от 3 до 30.

Отбор проб фасованного сырья и сборов

Транспортные упаковки, попавшие в выборку, вскрывают .

Из разных мест каждой транспортной упаковки методом случайной или систематической выборки отбирают потребительские упаковки.

Количество потребительских упаковок, необходимое для отбора рекомендуется ОФС 42-0013-03 (таблица 5) и зависит от массы фасовки:

40 г и более , отбираютпо 2

Если масса фасовки составляет 35 г и менее , отбираютпо 4 потребительские упаковки из каждой транспортной упаковки, попавшей в выборку.

Отобранные потребительские упаковки составляют объединенную про­бу, из которой отбирают4 специальные пробы .

В первую очередь отбирают:

1. Пробу для определения допустимых отклонений на промышленное фасование -10 невскрытых единиц фасованной продукции (пачек или паке­тов, контурных ячейковых упаковок, брикетов, пачек с фильтр-пакетами).

Допустимые отклонения массы содержимого упаковки при промышлен­ном фасовании ЛРС и сборов («ангро», в пачках, пакетах, фильтр-пакетах или брикетах) регламентируются ОФС 42-0013-03 (таблица 7 ) и зависят от диапазона измеряемых масс и количества упаковок.

Так, если

до 100 г , допустимое отклонение дляодной упаковки составляет±5%, а для10 упаковок - ±1,6%.

Диапазон измеряемых масс составляет от 100 до 200 г, допустимые от­клонения составляют соответственно±3% и ±0,9%.

Диапазон измеряемых масс составляет от 200 до 1000 г, ±2% и ±0,6%.

Диапазон измеряемых масс составляет от 1000 до 10000 г , допустимые отклонения составляют соответственно±1% и ±0,3%.

Диапазон измеряемых масс составляет свыше 10000 г, допустимые от­клонения составляют соответственно±0,2% и ±0,06%.

При этом, методика определения зависит от вида упаковки.

Если ЛРС и сборы поступают в фильтр-пакетах, 10 пачек вскрывают, из них произвольно отбирают20 фильтр-пакетов , содержимое которых вы­сыпают и взвешивают спогрешностью ±0,01 г , после чего вычисляют от­клонение массы порошка в фильтр - пакете от номинальной.

Если ЛРС и сборы поступают в брикетах, 10 контурных ячейковых упа­ковок брикетов вскрывают и взвешиваютс погрешностью ±0,01 г , после чего вычисляют отклонение массы порошка в фильтр - пакете от номи­нальной.

Если фасованное ЛРС поступает «ангро» в цельном или измельченном виде или в состоянии порошка (в пачках или пакетах), определение до­пустимых отклонений на промышленное фасование проводят в соответ­ствии с требованиями ОСТ 64 - 492 - 85.

Пробу для определения микробиологической чистоты - 5 невскрытых потребительских упаковокобщей массой не менее 50 г .

Упаковки вскрыва­ют, содержимое высыпают на гладкую чистую ровную поверхность, тща­тельно перемешивают и методом квартования выделяют пробу.

После отбора указанных проб отобранные упаковки объединенной пробы

вскрывают, содержимое высыпают на ровную гладкую чистую поверхность и

методом квартования выделяют:

Пробу для определения радионуклидов общей массой не менее 70 г. При­чем, объем данной пробы зависит от количества потребительских упаковок в объединенной пробе (ОФС 42-0013-03, таблица 6).

Например, если;

В объединенную пробу входитдо 100 потребительских упаковок, объем выборки составляет2 упаковки (но не менее 70 г);

В объединенную пробу входитот 101 до 200 потребительских упако­вок, объем выборки составляет3 упаковки (но не менее 70 г);

В объединенную пробу входитот 201 до 500 потребительских упако­вок, объем выборки составляет4 упаковки (но не менее 70 г);

В объединенную пробу входит501 и более потребительских упаковок,

объем выборки составляет5 упаковок (но не менее 70 г).

Анализ ЛРС на содержание радионуклидов проводят в соответствии с тре­бованиями ОФС 42-0011-03.

Среднюю пробу для выделения аналитических проб.

Массы средней и аналитических проб аналогичны таковым для сырья, поступающего партия­ми, регламентируются ОФС 42-0013-03 (таблицы 2 и 3) и зависят от морфо­логической группы и способу подготовки ЛРС.

Пробу для определения степени зараженности сырья амбарными вре­дителями при приемке фасованного ЛРС и сборов из объединенной пробы от­бирают только в случае обнаружения живых или мертвых вредителей в ходе анализа. При этом проводят дополнительный отбор пробы массой 500 г.

Маркировка образцов и документальное оформление отбора проб

Отборы проб каждой партии (серии) ЛРС оформляется документально в соответствии с требованиями ОФС 42-00-13-03:

1. Процедура отбора проб фиксируется в специальном «Журнале регистрации отбора проб», куда заносят:

Название лекарственного сырья;

Производитель;

Дата поступления ЛРС;

Количество транспортных единиц, из которых отобрана проба;

Дата отбора проб;

Масса отобранной пробы;

Общие замечания (включаявсе недостатки, выявленные при внешнем ос­мотре);

Фамилия, имя и отчество лица, производившего отбор проб.

2. На транспортных упаковках, из которых были отобраны пробы, указывают:

Номер партии (серии);

Производитель (поставщик);

Количество отобранной пробы;

Дата и место отбора пробы;

Номер сопроводительного документа (сертификата).

3. На этикетке, оформляемой для отобранной пробы, указывают:

Наименование лекарственного сырья;

Производитель (поставщик);

Номер партии (серии);

Номер сопроводительного документа (сертификата);

Дата и место отбора пробы;

Количество отобранной пробы;

Условия хранения образца;

Срок хранения пробы, номераемкости (упаковочной единицы), из кото­рой отобрана проба;

Фамилия, имя и отчество ответственного за отбор проб;

Номер записи в журнале регистрации отбора проб;

Указание, для какого вида анализа предназначена проба.

4. После проведения отбора проб и их оформления составляется «Акт отбора проб», в котором указывают следующие данные:

Фамилия, имя, отчество и должности лиц, произведших отбор проб;

Дата и место отбора проб;

Наименование продукции;

Производитель;

Номер серии (партии);

Объем поставки;

Количество отобранных проб (с учетом архивного образца);

Срок годности ЛРС.

«Акт отбора проб» составляется в 2-х экземплярах.

Один экземпляр Акта ос­тается в организации, в которой отбирались образцы,

а второй - сопровож­дает образец вместе с остальными сопроводительными документами и вспо­могательной документацией (сертификаты или аналитический паспорт).

АНАЛИЗ АНАЛИТИЧЕСКОЙ ПРОБЫ № I

Аналитическая проба № 1 используется для установления (подтвержде­ния) подлинности ЛРС, а также определения его измельченности и содержания примесей.

Определение (подтверждение) подлинности

Под подлинностью понимают соответствие сырья своему наименова­нию. Подлинность ЛРС устанавливают (подтверждают) приемами макро- и

микроскопического анализа по методикам, изложенным в общих статьях ГФ (вып.1), а также при помощи качественных реакций.

Определение измельченности

У цельного сырья измельченность определяют просеиванием аналитической пробы№ 1 сквозь сито с диаметром отверстий, указанным в частном нормативном документе.

Просеивают осторожно, обязательно закрывают сито крышкой. Просеивание считают законченным, если при дополнительном просеве в течение 1 минуты масса, прошедшего сквозь сито сырья, составляет Менее 1% массы сырья, оставшегося на сите.

Сырье, прошедшее сквозь сито взвешивают и вычисляют в процентах к массе аналитической пробы. Если НТД не требует просеивания сырья, то измельченность ЛРС не определяют.

Для некоторых видов сырья, например, подземные органы и коры НТД, требует определить кусочки сырья определенных размеров. В этом случае и отбирают вручную, взвешивают и рассчитывают в процентах.

Для измельченного сырья берут два сита, так как определяют и содержание измельченных частиц, но и частиц больших размеров, так называемых частиц, не проходящих сквозь сито. Сырье просеивают сквозь 2 сита, диаметр которых указан в НТД, взвешивают на ручных весах сырье с верхнего сита и сырье прошедшее сквозь нижнее сито, и рассчитывают в процентах к массе аналитической пробы. Допустимые нормы указаны в НТД.

Определение содержания примесей

Для цельного сы рья после определения измельченности, оставшуюся на сите часть аналитической пробы № 1вручную на чистой гладкой поверхности лопаточкой или пинцетом разбирают на посторонние примеси, указанные в ФС в разделе «Числовые показатели». Обычно это:

Части сырья, утратившие нормальную окраску (побуревшие, почерневшие);

Части производящего лекарственного растения, не являющиеся сырьем;

Органическая примесь (части посторонних неядовитые растения);

Минеральная примесь (земля, песок и камни, которые можно отобрать вруч­ную).

Каждую примесь взвешивают отдельно и рассчитывают в процентах к массе 1-ой аналитической пробы. Одновременно обращают внимание на нали­чие амбарных вредителей.