Проведения анализов и определения характеристики сырья. Фармакогностический анализ лрс. фитохимический отбор объединенной пр

Лекарственные средства, в том числе лекарственное растительное сырье, применяемое в медицинской практике, должны отвечать всем современным требованиям безопасности для человека и быть эффективными для лечения различных заболеваний.

Для обеспечения высокого качества сырья необходимо правильно выбрать район и место его произрастания с учетом экологических и экономических факторов (растение должно иметь промышленные запасы, его заготовка должна быть оправдана с экономической точки зрения, а также занимать площадь, неиспользуемую для пастбищ и земледелия, а для культивируемых видов район культуры. Регламентируются сроки сбора сырья и его приемы, характер первичной его обработки, условия сушки, сортировки и упаковка.

Эти условия на каждый вид сырья описаны в единых для всех заготовителей нормативных документах "Инструкции по сбору и сушке лекарственного растительного сырья", которые имеют силу закона.

Условия, обеспечивающие качество лекарственного растительного сырья - это нормы, обеспечивающие определение подлинности, чистоты и доброкачественности сырья. Они регламентируются стандартом и определяются при проведении полного товароведческого анализа конкретного вида сырья .

О доброкачественности и подлинности сырья судят по макроскопии, микроскопии, влажности, зольности, количественного содержания действующих веществ, тяжелых металлов, радионуклидов, а также по данным микробиологической чистоты .

Макроскопия (внешние признаки) является важнейшим показателем подлинности и чистоты сырья. При описании данного показателя указывается состав сырья, т.е. чем представлено сырье (листья, стебель, корни и т.д.); характерные морфологические признаки цельного, резаного или порошкованного сырья, его запах и вкус (для не ядовитых видов), а также размеры.

Микроскопия. Данный показатель содержит диагностические признаки анатомического строения сырья (для некоторых видов приводится люминесцентная микроскопия), вид микропрепарата, на котором проводится исследование, и относится к важнейшему методу определения подлинности лекарственного сырья.

Идентификация сырья. В этом разделе приводятся качественные (идентификации химических веществ с помощью специфичных реагентов) реакции на действующие вещества, спектральные данные (ИК-, УФ-спектры), данные различных методов хроматографии (ТСХ, БХ, ГХ, ГЖХ, ВЭЖХ) с использованием при этом стандартных образцов, методики и условия выполнения эксперимента. Использование тех или иных методов анализа определяется достаточностью определения подлинности вида лекарственного растительного сырья.

Числовые показатели. В этот раздел включены специфические показатели и их нормы - для цельного, резаного или порошкованного сырья, которые являются стандартом для всех видов лекарственного растительного сырья и определяют его качество: содержание действующих или экстрактивных веществ, золы общей и золы, нерастворимой в 10 % растворе хлористоводородной кислоты, примесей и измельченности.

Степень измельчения. ЛРС измельчается до определенной степени в соответствии с частными статьями ГФ РК. Как правило, листья и трава измельчаются до 7 мм; стебли, корни, корневища, кора - в основном до 7 мм; плоды и семена - до 0,5 мм; цветки не измельчаются. Основное правило - измельчать сырье без остатка. Здесь подразумевается то, что нужно брать такое количество сырья и измельчать его, которое требуется для приготовления лекарственного препарата (ЛП), т.к. при последующем хранении измельченное сырье потеряет свои лечебные свойства.

Влажность - один из важнейших показателей доброкачественности ЛРС, влияющий как на состояние сырья, так и на содержание в нем действующих веществ. Под влажностью понимают потерю в массе сырья за счет удаления гигроскопической влаги и летучих веществ, которую определяют при высушивании сырья до постоянной массы.

Летучие вещества представлены преимущественно компонентами эфирных масел, а также некоторыми другими соединениями, которые при температуре определения (100-105°С) переходят в газообразное состояние и улетучиваются из ЛРС.

Зола - один из основных показателей доброкачественности ЛРС, под которым понимают несгораемый остаток минеральных веществ после сжигания навески ЛРС и последующего ее прокаливания до постоянной массы. Количество золы в растительном сырье колеблется в определенных пределах и зависит как от специфики самого сырья, так и способа его сбора и условий сушки. В золе чаще всего содержатся следующие элементы: К, Na, Mg, Са, Fe, С, Si, Р, реже и в меньшем количестве Сu, Mn, Al и др. Эти элементы находятся в золе в виде оксидов или солей угольной, фосфорной, серной и других кислот.

Зола бывает:

Зола общая - это сумма минеральных веществ, которые первоначально содержались в производящем растении, и минеральных веществ, которые попали в сырье из окружающей среды (пыль, песок, земля и т.д.).

Зола, нерастворимая в 10% растворе хлороводородной кислоты - это, как правило, кремния оксид, который образовался из минеральных веществ, свойственных как производящему растению, так и попавших в ЛРС из окружающей среды (пыль).

Зола сульфатная (сульфатные шлаки) - это показатель для определения примесей, включающих органические соединения металлов, нерастворимых в воде .

Также проводят определение степени зараженности сырья амбарными вредителями.

Исследования на наличие амбарных вредителей проводят в обязательном порядке при приемке лекарственного растительного сырья, а также ежегодно при хранении.

Сырье проверяют на наличие живых и мертвых вредителей невооруженным глазом или с помощью лупы при пяти-десятикратном увеличении при внешнем осмотре, а также при определении измельченности и содержания примесей.

Если были обнаружены вредители, то в специальной пробе устанавливают степень заражения. Для этого пробу сырья просеивают сквозь сито с диаметром отверстий 0,5 мм и в отсеве проверяют наличие клещей.

Различают 3 степени заражения клещами и другими амбарными вредителями в пересчете на 1 кг ЛРС.

При наличии клещей выделяют:

1 степень - до 20 клещей;

2 степень - больше 20, но они свободно передвигаются по сырью;

3 степень - больше 20, клещи образуют сплошные войлочные массы.

Возможность дальнейшего использования ЛРС, зараженного амбарными вредителями, определяется степенью зараженности и видом сырья.

Количественное определение. Приводится методика количественного определения основных действующих веществ в виде суммарного содержания (сумма веществ), в пересчете на какое-либо вещество, содержащееся в данном сырье .

Кроме этого сырье должно пройти радионуклидный контроль и анализ на содержание тяжелых металлов, микробиологическую чистоту.

Лекарственные растения не относятся к основным источникам поступления ксенобиотиков (ксенобиотики - условная категория для обозначения чужеродных для живых организмов химических веществ, естественно не входящих в биотический круговорот) в организм человека. Однако необходимо учитывать специфику кумуляции в лекарственном растительном сырье, как отдельных радионуклидов, так и суммарную удельную активность, потому что некоторые лекарственные растения способны накапливать определенное количество радионуклидов, которые в последующем переходят в человеческий организм по экологической цепочке "почва - лекарственное растительное сырье - лекарственная форма - человек".

Радиоактивные изотопы, находящиеся в почве, как правило, переходят в корневые системы растений точно так же, как и стабильные изотопы тех же элементов. В случае сходства химических свойств стабильных и радиоактивных элементов они поступают в растение в исходных пропорциях.

Попадая из почвы в лекарственное растение, радиоактивные элементы в зависимости от своих химических свойств проникают в наземные части или задерживаются в корневой системе .

В настоящее время отечественная и зарубежная HТД не регламентирует требования по предельному содержанию радиоксенобиотиков в лекарственном растительном сырье. Отсутствие точно установленных закономерностей процесса перехода и накопления радионуклидов в лекарственном растительном сырье затрудняет разработку предельно допустимых уровней и ведение контроля за качеством продукции.

До недавнего времени систематические данные об уровнях радиоактивности и радионуклидном составе лекарственных растений и их сырья были представлены в единичных работах. Авария на Чернобыльской АЭС, случившаяся 26 апреля 1986 г., а также многолетние ядерные испытания на Семипалатинском полигоне явились причиной систематизации подобных сведений, нашедших свое отражение в концепции защиты населения и хозяйственной деятельности на территориях, подвергшихся радиоактивному загрязнению. В последнем случае лекарственные растения могут рассматриваться, с одной стороны, как биогенные индикаторы радиоэкологической обстановки территории, подвергшейся радиоактивному загрязнению в результате ядерных взрывов, а с другой стороны - как объекты эколого-гигиенического регламентирования, требующие несколько иного подхода по сравнению с нормированием пищевого и водного факторов.

Современные экологические условия приводят к накоплению в лекарственных растениях различных экотоксикантов. Экологические исследования лекарственных растений начались в 60-е годы прошлого века в Германии. Именно в них было установлено, что содержание токсичных веществ в лекарственном растительном сырье может достигать более высоких концентраций, чем в пищевых продуктах, что и послужило причиной изучения этой проблемы в разных странах.

В настоящее время тяжелые металлы обнаруживаются практически во всех элементах биосферы, а поступление их в организм человека может нанести вред здоровью. В окружающую среду большое количество токсичных металлов поступает вследствие сжигания угля и нефти, использования удобрений, а также со сточными водами. В растения тяжелые металлы поступают из почв и атмосферы в результате пылевого загрязнения. Из почвы поступают Cd, Cu, Zn, которые аккумулируются в тканях растений; Pb преимущественно оседает на поверхности листьев, цветков, плодов, в меньшей степени - стеблей.

В почвы тяжелые металлы могут поступать со сточными водами (Zn, Cr, Pb, Hg и в меньшей степени Cd). Тяжелые металлы обладают неодинаковой способностью к накоплению в растениях, например, легко поглощаются Cd, Zn, по сравнению с ними Cu поглощается в меньшей степени; Mn, Ni поглощаются слабо; труднодоступны растениям Fe и др. элементы. Поэтому проблема содержания тяжелых металлов в лекарственном растительном сырье привлекает внимание исследователей во всем мире .

Определение качества фитопрепаратов имеет свои особенности. Это обусловлено, прежде всего, тем, что химический состав таких препаратов, как правило, достаточно сложный, и активные компоненты зачастую неизвестны. Кроме того, многие из них нестабильны, а сырье имеет естественное происхождение и в химическом отношении непостоянно.

Например, зверобой продырявленный (Hypericum perforatum) имеет широкое применение в фитотерапии - в первую очередь благодаря своему успокаивающему и антидепрессантному действию. Содержит целый ряд веществ, которые содействуют его фармакологическому эффекту. При применении зверобоя или препаратов с его содержанием могут появиться признаки фитотоксичности, особенно при взаимодействии с другими лекарственными средствами (например, индинавир, дигоксин, теофилин, варфарин, циклоспорин, пароксети и т.д.) .

Тема 1. Фармакогностический анализ лекарственного растительного сырья. Макроскопический анализ.
Цель занятия:

На основе знаний ботаники научиться проводить макроскопический анализ лекарственного растительного сырья.
I. Вводная часть

Основные термины и понятия

Фармакогнозия (от греч. Pharmacon – лекарство, яд и gnosis – изучение, познание) – одна из фармацевтических наук, изучающая лекарственные растения, лекарственное растительное сырье и некоторые продукты первичной переработки растений и животных.

Лекарственные растения (ЛР) – виды, содержащие биологически активные вещества, действующие на организм человека и животных и используемые для заготовки лекарственного растительного сырья, применяемого с лечебными целями.

Лекарственное растительное сырье (ЛРС) – высушенные или свежесобранные растения или их части и органы, служащие сырьевыми источниками для изготовления лекарственных средств.

ЛРС, разрешенное к применению органами Министерства здравоохранения и включенное в Государственный реестр, называются официнальными (от латинского officina – аптека). ЛРС, входящее в Государственную фармакопею, называют фармакопейными .

Под продуктами первичной переработки растений понимают полученные из ЛРС эфирные и жирные масла, камеди, смолы и др.

Лекарственное животное сырье - это животные, их высушенные органы или выделения, используемые для получения лекарственных средств. В современной фармакогнозии объекты животного происхождения единичны (пиявки, панты марала, изюбра или пятнистого оленя, желчь крупного скота, продукты жизнедеятельности пчелы, змеи и т, д.).

Биологически активные вещества (БАВ) – вещества, которые оказывают влияние на биологические процессы в организме человека и животных.

Действующие вещества – биологически активные вещества, которые определяют Фармакологическое действие (терапевтическую ценность) ЛРС. Они могут изменять состояние и функции организма, проявляют профилактическое, диагностическое или лечебное действие. Могут использоваться в виде субстанций в производстве готовых лекарственных форм.

Сопутствующие вещества – условное название продуктов метаболизма, которые присутствуют в ЛРС вместе с БАД. Они могут действовать на живой организм позитивно или негативно, усиливать или ослаблять влияние действующих веществ.

Лекарственное сырье и полученные из него продукты представляют собой полноценный материал в том случае, если они по всем параметрам соответствуют действующим нормативным документам (НД). Это соответствие определяется путем проведения фармакогностического анализа.

Под фармакогоностическим анализом подразумевается комплекс методов анализа сырья растительного и животного происхождения, позволяющим определить его подлинность и доброкачественность.

Подлинность – это соответствие исследуемого объекта наименованию, под которым он поступил на анализ. (как правило, устанавливается путем макроскопического и микроскопического анализа, а также используются элементы фитохимического анализа: качественные реакции на БАВ, хроматография)

Доброкачественность – соответствие лекарственного сырья требованием нормативных документов (определяется на основе данных товароведческого и фитохимического анализов, определения содержания БАВ и если необходимо, путем установления биологической активности сырья).

Фармакогностический анализ нормативно регулируется документами двух типов:

ГОСТ и соответствующие общие статьи ГФ, нормирующие правила приемки, методы отбора проб, методы определения подлинности и доброкачественности лекарственного растительного сырья;

ГОСТ, ФС, ФСП, ОСТ и ТУ, определяющие требования к конкретному виду сырья.

^

Государственные требования к качеству ЛРС изложены в общих и частных статьях Государственной фармакопеи XI издания (ГФ XI). Первый том ГФ XI включает 20 общих статей на сырье, в которых дано определение основным понятиям фармакогнозии: листья, травы, цветки, плоды, семена, коры, корни, корневища, клубни, луковицы, влажность сырья, зола общая, зола, нерастворимая в 10%HC1, органическая, минеральная примесь. Дано также определение фармакогностическим понятиям «сборы», «эфирные масла», «экстрактивные вещества». В общих статьях сформулированы характеристики подлинности различных морфологических групп сырья, методы их определения, перечислены показатели качества (числовые показатели - содержание действующих веществ, влажность, зола общая, зола, нерастворимая в 10% HC1, примеси, измельченность). Методики определения влажности, золы общей, золы, нерастворимой в 10% НС1, экстрактивных веществ, дубильных веществ, эфирного масла приведены в соответствующих общих фармакопейных статьях. Поэтому в частных статьях на ЛРС приводятся только соответствующие показатели, дается ссылка на общую статью, в которой описана подробно методика определения этого показателя, и приведено их нормирование (например, содержание эфирного масла не менее 1%, влажность не более 14% и т.д.).

В общей статье «Техника микроскопического и микрохимического иссле­дования лекарственного растительного сырья» описана подготовка сырья различных морфологических групп различной степени измельчения (цельного, резаного, дробленого, порошкового) к исследованию.
Общая статья дает определение понятию подлинность ЛРС, перечисляет категории примесей, приводит методики определения примесей и измельченности Характеристика общих и частных статей Государственной фармакопеи.

Государственные требования к качеству ЛРС изложены в общих и частных статьях Государственной фармакопеи XI издания (ГФ XI). Первый том ГФ XI включает 20 общих статей на сырье, в которых дано определение основным понятиям фармакогнозии: листья, травы, цветки, плоды, семена, коры, корни, корневища, клубни, луковицы, влажность сырья, зола общая, зола, нерастворимая в 10%HC1, органическая, минеральная примесь. Дано также определение фармакогностическим понятиям «сборы», «эфирные масла», «экстрактивные вещества». В общих статьях сформулированы характеристики подлинности различных морфологических групп сырья, методы их определения, перечислены показатели качества (числовые показатели - содержание действующих веществ, влажность, зола общая, зола, нерастворимая в 10%HC1, примеси, измельченность). Методики определения влажности, золы общей, золы, нерастворимой в 10% НС1, экстрактивных веществ, дубильных веществ, эфирного масла приведены в соответствующих общих фармакопейных статьях. Поэтому в частных статьях на ЛРС приводятся только соответствующие показатели, дается ссылка на общую статью, в которой описана подробно методика определения этого показателя, и приведено их нормирование (например, содержание эфирного масла не менее 1%, влажность не более 14% и т.д.).

В общей статье «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» описана подготовка сырья различных морфологических групп различной степени измельчения (цельного, резаного, дробленого, порошкового).

Общая статья «Определение подлинности, измельченности и содержания примеси в лекарственном растительном сырье» дает определение понятию подлинность ЛРС, перечисляет категории примесей, приводит методики определения примесей и измельченностн ЛРС.

В 1997 году утверждено дополнение к общей фармакопейной статье «Методы микробиологического контроля лекарственных средств». Это дополнение предусматривает обязательное определение микробиологической чистоты лекарственного растительного сырья. В нем приведена микробиологическая чистота субстанций и вспомогательных материалов, где по категориям 4.2 и 5.2 охарактеризовано лекарственное растительное сырье. В разделе микробиологической чистоты готовых лекарственных средств в категории Зд и Зе включены лекарственные средства из растительного сырья.

Статьи на отдельные виды лекарственного растительного сырья приве­дены во втором томе ГФ XI. Их 83 и они расположены в алфавитном порядке в соответствии с латинскими названиями сырья: Cormus, Cortex, Hores, Folia, Fructus, Gemmae, Herba, Radices. Rhizomata, Semina, Strobili и др.

В заголовке статьи дается название лекарственного растительного сы­рья на латинском и русском языках, приводится синоним названия сырья.

В вводной части статьи указывается время сбора сырья (приводятся календарные cроки или фаза вегетации растения), названии производящею растения или растений и семейства на русском и латинском языках, назначение лекарственного растительного сырья.

В разделе «Внешние признаки»

В разделе «Микроскопия»

В разделе «Качественные реакции»

В разделе «Числовые показатели» приводятся нормы содержания действующих веществ, влаги, золы общей, золы, нерастворимой в 10 % растворе хлористоводородной кислоты, частей сырья, утративших естественную окраску. измельченных частей сырья, частей производящего растения, не подлежащих сбору, примесей - органической (части других неядовитых растений) и минеральной (земля, песок, камешки) и др.

В разделе

В разделе «Миробиологическая чистота»

В разделе «Упаковка»

«Срок годности»

«Хранение»,

В 1997 году утверждено дополнение к общей фармакопейной статье «Методы микробиологического контроля лекарственных средств». Это дополнение предусматривает обязательное определение микробиологической чистоты лекарственного растительного сырья. В нем приведена микробиологическая чистота субстанций и вспомогательных материалов, где по категориям 4.2 и 5.2 охарактеризовано лекарственное растительное сырье.

В разделе микробиологической чистоты готовых лекарственных средств в категории Зд и Зе включены лекарственные средства из растительного сырья.

Статьи на отдельные виды лекарственного растительного сырья приведены во втором томе ГФ XI. Их 83 и они расположены в алфавитном порядке в соответствии с латинскими названиями сырья: Cormus, Cortex, Hores, Folia, Fructus, Gemmae, Herba, Radices. Rhizomata, Semina, Strobili и др.

В заголовке статьи дается название лекарственного растительного сырья на латинском и русском языках, приводится синоним названия сырья.

В вводной части статьи указывается время сбора сырья (приводятся календарные сроки или фаза вегетации растения), названии производящею растения или растений и семейства на русском и латинском языках, назначение лекарственного pacтительного сырья.

В разделе «Внешние признаки» приводится описание характерных морфологических признаков цельного и резаного (дробленого) сырья. В конце раздела указывается характерный запах и вкус (для неядовитых видов сырья).

В разделе «Микроскопия» указаны основные диагностические признаки анатомического строения сырья. Здесь же приводятся характерные микрохимические и гистохимические реакции, которые выполняются одновременно с микроскопическим изучением сырья.

В разделе «Качественные реакции» указаны реакции на подлинность сырья, а также хроматографические пробы; приведены методики их выполнения и результаты.

В разделе «Числовые показатели» приводятся нормы содержания действующих веществ, влаги, золы общей, золы, нерастворимой в 10"о растворе хлористоводородной кислоты, частей сырья, утративших естественную окраску. измельченных частей сырья, частей производящего растения, не подлежащих сбору, примесей - органической (части других неядовитых растений) и минеральной (земля, песок, камешки) и др.

В разделе «Количественное определение» приводится методика количественного определения действующих веществ с подробным описанием подготовки сырья и проведением анализа. Если методика количественного определения изложена в общей статье Государственной фармакопеи, то дается ссылка на нее.

В разделе «Миробиологическая чистота» указывается категория 5.2 в соответствии с дополнением к общей статье «Методы микробиологического контроля лекарственных средств.

В разделе «Упаковка» указываются виды упаковки, используемой для данного вида цельного сырья (мешки, тюки и др.) и измельченного (пачки и др.) и масса (нетто) сырья в единице упаковки.

Для сильнодействующего сырья в разделе «Срок годности» указывается время, в течение которого сырье при хранении в условиях, предписанных общей статьей ГФ XI «Хранение лекарственного растительного сырья», удовлетворяет требованиям нормативной документации (НД) и может использоваться по назначению.

Для сильнодействующего лекарственного растительного сырья в частной фармакопейной статье вводится раздел «Хранение», где указывается список (А или Б), по которому оно храниться.

Заканчивается частная фармакопейная статья указанием фармакологической группы, к которой относится данное сырье.
Государственная фармакопея СССР является сборником обязательных общегосударственных стандартов и положений, нормирующих качество лекарственных средств.

Государственная фармакопея имеет законодательный характер.
Фармакогностический анализ складывается из ряда последовательных проводимых анализов. Правила проведение анализов регламентируется соответствующими статьями Государственной Фармакопеи (ГФ).

На данном занятии подробно будет рассмотрен макроскопический анализ лекарственного растительного сырья. Общие правила проведения макроскопического анализа для установления подлинности указаны в статьях ГФ XI «Листья» (т. 1 с. 252), «Травы» (т. 1 с. 256), «Цветки» (т.1 с. 257), «Плоды» (т.1 с. 258), «Семена» (т.1 с. 260), «Кора» (т.1 с. 261), «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы» (т.1 с.263). Полученные в результате такого анализа данные сравнивают с данными, приведенными в разделе «Внешние признаки» НД на анализируемый вид сырья.
II. Самостоятельная работа студентов на занятии.

Проведите макроскопический анализ различных морфологических групп ЛРС в соответствии с требованиями ГФ XI и сформулируйте заключение о его подлинности.

Задание 1. Макроскопический анализ лекарственного растительного сырья «Листья» - «Folia».

Листьями в фармацевтической практике называют лекарственное сырье, представляющее собой высушенные или свежие листья или отдельные листочки сложного листа. Листья собирают обычно вполне развитые, с черешком или без черешка.

При определении внешних признаков мелкие и кожистые листья обычно исследуют сухими; крупные тонкие листья, которые в сырье, как правило, бывают смятыми, предварительно размачивают, погружая на несколько минут в горячую воду, после чего раскладывают на стеклянной пластинке или клеенке, тщательно расправляя.

Используя алгоритм № 1 и схему № 1 (приложения) опишите предложенный образец сырья.

Задание 2. Макроскопический анализ лекарственного растительного сырья «Цветки» - «Flores».

Цветками в фармацевтической практике называется лекарственное растительное сырье, представляющее собой высушенные отдельные цветки или соцветия, а также их части. Цветки собирают обычно в начале цветения, некоторые - в фазу бутонизации.

В сырье определяют тип соцветия, опушенность; затем сырье размачивают, опуская его в горячую воду на 1 мин, и рассматривают невооруженным глазом или с помощью лупы (10Х) строение цветка (или соцветия). Цветок помещают на предметное стекло и под лупой разделяют его препаровальными иглами на отдельные части.

Используя алгоритм № 2 и схему № 2 (приложения) опишите предложенный образец лекарств сырья.

Задание 3. Макроскопический анализ лекарственного растительного сырья «Плоды» - «Fructus».

Плодами в фармацевтической практике называют простые и сложные, а также ложные плоды, соплодия и их части. Плоды собирают зрелыми и высушивают. Некоторые сочные плоды перерабатывают свежими.

Плоды исследуют сухими, рассматривая их невооруженным глазом или с помощью лупы (10Х). Сочные плоды, изменившие во время сушки форму, рассматривают сначала в сухом виде, а затем после размачивания в горячей воде или кипячения в течение 5-10 мин.
Используя алгоритм № 3 и схему № 3

Задание 4. Макроскопический анализ лекарственного растительного сырья «Трава» - «Herba».

Травами в фармацевтической практике называют лекарственное растительное сырье, представляющее собой высушенные или свежие надземные части травянистых растений.

Травы собирают во время цветения, иногда во время бутонизации или плодоношения. Сырье состоит из стеблей с листьями и цветками, отчасти с бутонами и незрелыми ягодами. У одних растений собирают только верхушки, у других - всю надземную часть, у третьих - надземную часть растения собирают вместе с корнями.
Используя алгоритм № 4 и схему № 4 (приложения)

Задание 5. Макроскопический анализ лекарственного растительного сырья «Кора» - «Cortex».

Корой в фармацевтической практике называют наружную часть стволов, ветвей и корней деревьев и кустарников, расположенную к периферии от камбия. Кору как правило, заготовляют весной, в период сокодвижения и высушивают.
Используя алгоритм № 5 , опишите предложенный образец сырья.

Задание 6 . Макроскопический анализ лекарственного растительного сырья «Корни», «Корневища», «Луковицы», «Клубни», «Клубнелуковицы».

В фармацевтической практике используют высушенные, реже свежие подземные органы многолетних растений, собранные чаще осенью или ранней весной, очищенные или отмытые от земли, освобожденные от отмерших частей, остатков стеблей и листьев. Крупные подземные органы перед сушкой разрезают на части (продольно или поперек).

Сырье может быть представлено корнями - radices, корневищами - rhizomata, корневищами и корнями - rhizomata et radices, корневищами с корнями - rhizomata cum radicibus, луковицами - bulbus. клубнями - tubera и клубнелуковицами - bulbotubera.
Используя алгоритм № 6 , опишите предложенный образец сырья.

III. Вопросы для самоконтроля.

1. 
   Дайте определение науки фармакогнозии.
2. 
   Сформулируйте цели и задачи фармакогнозии.
3. 
   Дайте определение понятий: лекарственное растение (ЛР), лекарственное растительное сырье (ЛРС), биологическиактивные вещества (БАВ), действующие вещества, сопутствующие вещества, фитопрепарат, подлинность, доброкачественность.
4. 
   Перечислите типы категорий нормативно-технической документации на лекарственное растительное сырье и ее основные разделы.
5. 
   Фармакогностический анализ: определение, составляющие фармакогностического анализа и сущность этих методов.
6. 
   Дайте определение различным видам лекарственного растительного сырья: «листья», «цветки», «плоды», «травы», «корни, корневища».
7. 
   Почему исследование ЛРС должно начинаться с макроскопического анализа?
8. 
   Как подготовить образец сырья к макроскопическому анализу.
9. 
   Макроскопический анализ различных групп лекарственного растительного сырья (Алгоритмы исследования).

Описание презентации ФАРМАКОГНОСТИЧЕСК ИЙ АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ по слайдам

Фармакогностический анализ лекарственного растительного сырья Цели и задачи. Международные требования к качеству ЛРС и ЛС. Нормативные документы на ЛРС, их функции. Государственная фармакопея (ГФ РБ). Структура фармакопейной статьи на ЛРС. Схема товароведческого анализа ЛРС. Фармакогностический анализ, его разделы и методы по определению подлинности и доброкачественности ЛРС: макро- и микроскопический, фитохимический, биологический анализы, поражение насекомыми и микробами, радиационную чистоту, влажность, зольность, содержание ДВ и др.

ЛРС и получаемые из него ЛС могут быть представлены на рынке как товар, если они по всем параметрам соответствуют НД. Чтобы определить, соответствует ли ЛРС требованиям действующих в настоящее время в РБ НД, проводят фармакогностический анализ ЛРС, для осуществления которого необходимо: ▪ знать действующие НД и их новейшие изменения; ▪ уметь выполнять весь анализ. Система государственного контроля осуществляет проверку качества ЛРС на соответствие требованиям НД на аптечных складах (базах), фармацевтических фабриках, предприятиях, занимающихся выращиванием ЛРС, переработкой и поставкой его или готовых ЛС на фармацевтический рынок РБ. При отправке ЛРС другим аптечным складам (базам), фабрикам и предприятиям каждая партия сопровождается заверенной копией протокола анализа, удостоверяющей качество партии, и при поступлении на другие склады ЛРС повторному анализу не подвергается, за исключением случаев, когда возникают сомнения в его качестве.

Фармакогностический анализ – это комплекс методов анализа ЛРС, сырья животного происхож-дения и их продуктов, устанавливающий их подлинность и доброка чественность по всем параметрам НД. Т. о. , анализ ЛРС и ЛС из него проводят, прежде всего, с целью установления подлинности и доброкачественности ЛРС. Фармакогностический анализ ЛРС складывается из ряда последовательных анализов, или этапов: товароведческого, макроскопического, микроскопического, фитохимического; в некоторых случаях он дополняется определением биологической активности ЛРС.

Анализ ЛРС и ЛС из него проводят, прежде всего, с целью установления подлинности и доброкачественности ЛРС. Подлинность – это соответствие исследуемого сырья наименованию, под которым оно поступило для анализа. Устанавливается методами: макроскопическим, микроскопическим, качественным фитохимическим, хроматографическим, люминисцентным. ▫ во всех случаях проводятся первый и второй виды анализа, третий и четвертый – выполняются реже. Доброкачественность – соответствие ЛРС требованиям НД. Определяется следующими видами анализа: товароведческим (определение подлинности, измельченности, содержания примесей, зараженности амбарными вредителями), количественным фитохимическим анализом (определение влаги, золы, действующих или экстрактивных веществ), определение микробиологический чистоты, содержания пестицидов, токсических веществ, радионуклидов, биологической стандартизацией (для сырья, содержащего сердечные гликозиды).

Стандартизация ЛРС, НД Стандартизация – система норм качества сырья, продукции, методов испытания, установленная в общегосударственном порядке и обязательная для производителей и потребителей. Обязательные нормы и требования, предъявляемые к ЛРС, излагаются в НД и стандартах. В настоящее время имеются следующие категории НД: GMP (Good Manufacturing Practices for pharmaceuticals products: Main principles. Geneva: World Health Organization Technical Reports Series, 2003, N 908) − комплекс международных тре- бований к условиям производства и контролю качества ЛРС, ГФ РБ, ФС, ГОСТы. Помимо ГОСТов на конкретные виды ЛРС имеются методические ГОСТы (МГОСТЫ), определяющие правила испытания ЛРС; отраслевые стандарты (ОСТы), стандарты предприятий (СТП) и технические условия (ТУ). ■ ФС разрабатывают на ЛРС серийного производства, разрешен- ное для медицинского применения и включенное в Государствен- ный реестр, фактически ФС является отраслевым стандартом.

Среди стандартов в контроле качества конечного продукта и свойств серийно производимого ЛС раститель-ного происхождения (или получаемой из ЛРС субстанции) ФС занимает особое место. На современном этапе развития отечественной фармацевти-ческой промышленности и большого объема импортируе-мых лекарств ФС остаеся главным инструментом гарантии эффективности и безопасности ЛС для населения. Она утверждается сроком на 5 лет и регистрируется в МЗ РБ. Фармакопейные статьи на ЛРС, которые наиболее широко применяются в медицине, включаются в ГФ РБ, т. 2. Основным НД является ГФ РБ (включающая ФС на 120 ЛР). В РФ и ряде стран СНГ действует ГФ-XI, содержащая ФС на 88 видов ЛРС, требования которой на ЛРС обязательны для заготовительных организаций, баз перерабатки, складов и предприятий-потребителей. Номенклатура и НД на ЛРС регулярно пересматривается, меняется.

Структура и содержание фармакопейных статей. В заголовке статьи даётся ботанико-анатомическое название сырья на латинском и русском языках во множественном числе, кроме слова «трава» . Далее указывается, какая часть и когда собранного производящего растения, или растений, а также семейство на русском и латинском языках. Внешние признаки – краткое описание морфологических признаков сырья, цвет, вкус, запах и др. ; для сырья, которое относится к списку А, вкус не определяется. Измельчённое сырьё – приводятся размеры частиц сырья, если надо – его характеристика. Микроскопия – приводятся диагностические признаки сырья. Качественные реакции на основные действующие вещества – приводятся микрохимические реакции, хроматография. Числовые показатели – это нормы процентного содержания действующих веществ, влаги, золы, органических и минеральных примесей и так далее. Методы контроля, упаковка, маркировка, транспортировка, хранение, срок годности, основное фармакологическое действие. НД должна обеспечивать всемерное повышение качества ЛРС, она постоянно совершенствуется с учётом достижения науки и техники. Для примера можно привести следующую фармакопейную статью:

РINI GЕММАЕ– сосны почки PINI SILVESTRIS GEMMAE Собранные в конце зимы или ранней весной до начала распускания и высушенные почки сосны обыкновенной - Рinus silvestris L. , сем. сосновые – Рinaceaе. Внешние признаки. Почки (укороченные верхушечные побеги) одиночные или по нескольку штук в мутовках, окружающих более крупную центральную почку, без стебля или с остатком стебля, длиной не более 3 мм. Поверхность почек покрыта сухими, спи-рально расположенными ланцетовидными, заостренными бахромчатыми чешуйками, склеенными между собой выступающей смолой. Цвет снаружи розовато-бурый, в изломе зеленый или бурый. Длина почек 1 -4 см. Запах ароматный, смолистый. Вкус горьковатый. Микроскопия. При рассмотрении чешуйки под микроскопом с поверхности в централь-ной части ее видны трахеиды со щелевидными порами и заостренными концами и 2 смоляных хода, идущих от основания чешуйки до ее верхушки. Периферическая часть чешуйки состоит из сильно вытянутых клеток паренхимы, концы которых часто отогнуты к основанию чешуйки или заканчиваются свободно, образуя бахромчатость края чешуйки. Числовые показатели. Эфирного масла не 13%; золы общей не > 2%; почек, почерневших внутри, не > 10%; почек со стеблем длиной > 3 мм и переросших не > 10%; хвои не > 0, 5%; измельченных частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3 мм, не > 5%; органич. примеси не > 0, 5%; минеральной — не > 0, 5%. Количественное определение. Содержание эфирного масла определяют в 20 г крупно-измельченного (без просеивания) ЛРС методом 1 (ГФ XI, в. 1, с. 290). Время перегонки 1, 5 ч. Упаковка. Сырье упаковывают в мешки тканевые или льно-джуто-кенафные не более 25 кг нетто или в ящики из листовых древесных материалов не более 25 кг нетто. Фасуют почки сосны по 100 г в пачки картонные 8 -1 -4. Срок годности 2 года. Отхаркивающее средство.

ТОВАРОВЕДЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЛРС Товароведческому анализу подвергают все ЛРС, поступающее от различных заготовителей. Результаты анализов регистрируются в журнале. Прием ЛРС оформляется приемной квитанцией. Товароведческий анализ в большинстве случаев не требует сложного оборудования и выполняется на приемных пунктах, складах, базах. Он состоит из трех этапов: ▪ приемки сырья, ▪ отбора проб, ▪ методов испытаний.

ЛРС принимают мелкими и крупными партиями. В аптеки ЛРС поступает мелкими партиями по несколько кг в одной упаковке или в расфасованном виде. На склады поступают крупные партии ЛРС. Партией считается ЛРС одного наименования массой не менее 50 кг, однородного по всем показателям и оформлен. одним документом. В этом документе содержатся данные: № и дата выдачи, наименование и адрес отправителя, наименование ЛРС; № партии, масса, год и месяц сбора, место заготовки, результаты тестов о качестве ЛРС, обозначение НД на ЛРС, ФИО и подпись лица, ответственного за качество ЛРС.

Единицами продукции (товара) являются кипы, ящики, мешки, баулы и т. д. Каждую ед-цу товара вначале подвергают внешнему осмотру для установления соответствия упаковки и маркировки НД. Внимание обращают на состояние тары (ее повреждений, подмокания, гнили). Т. к. все единицы партии товара проверить сложно, делают выборку (табл. 1): в партии из 1– 5 ед. продукции анализируют все единицы, в партии из 6– 50 ед. анализу подвергают 5 ед. , находящихся вверху, середине и внизу товар. партии, а в партии из >, чем 50 ед-ц для анализа отбирают 10 % ед-ц продукции из разных мест партии, причем числа от 1 до 5 приравниваются к 10 единицам: (напр. , в 51 единице товара объем анализируемой выборки будет равен 6 единицам). Качество ЛРС в поврежденных единицах партии проверяют отдельно от неповрежденных, вскрывая каждую единицу.

Подлинность (идентичность) – это соответствие исследуемого объекта тому наименованию, под которым оно поступило для анализа. Подлинность ЛРС устанавливается путем: ▫ 1 — макро скопического анализа; ▫ 2 — микро скопического анализа; ▫ 3 — качественного химического анализа (качественных реакций); ▫ 4 — люминесцентного анализа; ▫ во всех случаях проводятся 1 и 2 виды анализа, 3 и 4 – выполняются реже.

■ Доброкачественность – это соответствие ЛРС требованиям НД. ■ Определяется следующими видами анализа: товароведческим (определение подлинности, измельченности, содержания примесей, зараженности амбарными вредителями), количественным фитохимическим анализом (определение влаги, золы, действующих или экстрактивных веществ), определение микробиологический чистоты, содержания пестицидов, токсических веществ, радионуклидов, биологической стандартизацией (для сырья, содержащего сердечные гликозиды).

Попавшие в выборку единицы продукции вскрывают и при внешнем осмотре определяют однородность ЛРС по способу подготовки (цельное, измельченное, прессованное и т. д.), цвету, запаху, засоренности; по наличию плесени, гнили, устойчивого постороннего запаха, не исчезающего при проветривании; по засоренности ядовитыми растениями и примесями (камни, стекло, сучья, перья, помет грызунов и птиц); на глаз и с помощью 10 -кратной лупы определяют наличие амбарных вредителей. В случае установления при внешнем осмотре неоднородности ЛРС, наличия плесени и гнили, засоренности посторонними растениями в количестве, превышающем допустимые нормы, вся партия должна быть рассор-тирована и вторично предъявлена к сдаче. Обнаружение затхлого, устойчивого запаха, несвойственного данному виду ЛРС, а также ядовитых растений и посторонних примесей (стекло, помет грызунов, птиц и т. д.), зараженности амбарными вредителями III степеней требует заключения что вся партия ЛРС бракуется и данное ЛРС не подлежит приёмке.

Методы отбора проб. Из каждой единицы продукции выборки (табл. 1) отбирают точечные пробы из трех разных мест – сверху, снизу и из середины, на глубине не менее 10 см; точечные пробы должны быть примерно одинаковыми по массе. Затем все точечные пробы смешивают и получают объединенную пробу, из к-рой методом квартования выделяют среднюю пробу Для этого ЛРС помещают на гладкую поверхность, распределяют тонкими равномерным слоем в виде квадрата, который делят по диагонали на 4 треугольника. Затем 2 противоположных треугольника удаляют, а 2 оставшихся соединяют, осторожно перемешивают (чтобы не измельчать ЛРС), разравнивают вновь на поверхности в виде квадрата и вновь делят по диагонали, удаляя 2 противоположных треугольника. Так повторяют до тех пор, пока в двух противоположных треугольниках не останется количество ЛРС, равное массе средней пробы на данное ЛРС (табл. 2). Неточности в массе средней пробы не должны отклоняться от данных табл. 2 на ± 10%.

При необходимости проводят еще определение: пестицидов генно-модифицированного ЛРС Схема проведения фамакогностического анализа ЛРС Вредители ЛРС: 1 – амбарный долгоносик и его личинка, 2 – хлебный точильщик и его личинка, 3 – хлебная (амбарная) моль и ее личинка, 4 – мучной клещ.

Установления степени зараженности амбарными вредителями. Из объединенной (не средней!) пробы методом квартования выделяют пробу массой 500 г для мелких видов ЛРС и 1000 г для крупных видов ЛРС. Эту пробу помещают в плотно закрывающуюся банку и вкладывают этикетку и направляют для анализа в лаборат-ю. Для установления степени зараженности сырья амбарными вредителями (см. схему анализа и рис.) соответствующую аналитическую пробу ЛРС помещают на сито с отверстиями диаметром 0, 5 мм и просеивают. В прошедшем сквозь сито сырье установленное количество вредителей и их личинок пересчитывают на 1 кг сырья. При наличии в 1 кг ЛРС ≤ (т. е. не более) 20 клещей и/или 5 штук хлебного точильщика, амбарной моли и ее личинок заражение относят к I степени; при наличии > (более) 20 свободно передвигающихся клещей и/или 6– 10 хлебных точильщиков либо амбарной моли – ко II степени; при наличии > (более) 20 клещей и/или более 10 хлебных точильщиков либо личинок амбарной моли – к III степени. ЛРС в III степени заражения бракуют.

Микробиологическая чистота ЛРС: — с термической обработкой: — без обработки: Аэробные бактерии - 10 7 , Аэробные - 10 5 Дрожжи, плесневые грибы - 10 5 , Дрожжи, плесневые - 10 4 Escherichia coli - 10 2 , Escherichia coli - 0 + для обоих вариантов: Salmonella - 0/10 г, Enterobacter - 10 3 /1 г. Радиационный контроль РДУ-99: 500 / 1000 г (мл) ЛРС: — плоды и ягоды - до 2590 Бк/кг, — остальное ЛРС - до 1850 Бк/кг.

Определение влажности. Аналитическую пробу для определения влажности ЛРС немедленно помещают в герметически упакованную банку. Под влажностью ЛРС понимают потерю в массе за счет гигро-скопической влаги и летучих веществ, которую определяют в ЛРС при высушивании до постоянной массы. Аналитическую пробу ЛРС (согл. табл. 3) измельчают и берут 2 навески по 3 -5 г, взвешенные с погрешностью ± 0, 01 г. Каждую навеску помещают в предварительно взвешенный высушенный бюкс с крышкой и ставят в нагретый до 100 -105 ºС сушильный шкаф. Первое взвешивание ЛРС (листьев, трав, цветков) проводят через 2 ч, а корней, корневищ, кор, плодов, семян – через 3 ч. ЛРС высушивают до постоянной массы: когда разница между двумя последующими взвешиваниями после 30 мин. высушивания и 30 мин. охлаждения в эксикаторе не превышает 0, 01 г. Определение потери в массе при высушивании рассчитывают на абсолют. сухое ЛРС: (m – m 1) . 100 Х% = ——— , m где m – масса ЛРС до высушивания, г; m 1 – масса после высушивания, г; Х – влажность ЛРС, %. За окончательный результат берут среднее арифметическое двух параллельных определений, вычисленных до 0, 1%.

Определение содержания золы. Фармакогностический анализ требует различать в ЛРС различают два вида золы: 1) золу общую, 2) золу нерастворимую в 10% HCl. Общую золу определяют на основе получения несгораемого остатка неорганических в-в после сжигания и прокаливания ЛРС. Для этого 3 -5 г измельченного ЛРС помещают в предварительно прокаленный и точно взвешенный фарфоровый тигель. Тигель осторожно нагревают, позволяя ЛРС сгореть при возможно более низкой температуре. При неполном сгорании частиц остаток охлаждают, смачивают водой или насыщенным раствором NH 4 NO 3 , выпаривают на водной бане и остаток прокаливают. Прокаливание ведут при слабом красном калении (около 500 ºС) до постоянной массы, избегая сплавления золы и спекания со стенками тигля. В случае необходимости операцию повторяют несколько раз. После прокаливания тигель охлаждают в эксикаторе и взвешивают. Постоянная масса считается достигнутой, если разница между 2 последующими взвешиваниями не превышает 0, 0005 г.

Для определения золы, нерастворимой в 10% HCl , в тигель с общей золой наливают 15 мл соляной кислоты (HCl) определенной НД плотности; тигель покрывают часовым стеклом и нагревают на кипящей бане 10 мин. После остывания содержимое фильтруют через беззольный фильтр. Тигель, часовое стекло и фильтр промывают дист. водой до прекращения появления мути в промывных водах от капли индикатора – 2 %-го Ag. NO 3. Затем фильтр помещают в тигель, высушивают, сжигают, и тигель прокаливают до постоянной массы. Проводят 2 параллельных определения. Содержание общей золы в % в абсолютно сухом ЛРС и золы, нерастворимой в HCl, рассчитывают по формулам НД. Если общая зола представляет собой сумму минеральных в-в ЛРС и кремнезема, то нерастворимая в HCl зола – это, практически, один кремнезем. Вычитая из общей золы массу кремнезема, можно определить сумму минеральных веществ, содержащихся в сырье (обычно почти 50% массы этих элементов составляет калий).

Фитохимические реакции по идентификации ЛРС подразделяют на следующие виды: к а ч е с т в е н н ы е х и м и ч е с к и е р е а к ц и и, для проведения к-рых делают водные или водно-спиртовые извлечения из исследуемого сырья. Эффект наблюдают при добавлении соответствующего реактива к полученному извлечению. Для выполнения этих реакций обычно используют пробирки, часовые или предметные стекла с лунками; м и к р о х и м и ч е с к и е р е а к ц и и ведут одновременно с микроскопическим анализом ЛРС, наблюдая результаты невооруженным глазом и под микроскопом: такое проведение реакции значительно повышает их чувствительность. Например, на предметное стекло помещают извлечение свежего растительного материала, содержащего алкалоиды, а рядом помещают каплю раствора пикриновой к-ты, после чего содержимое обеих капель соединяют тонким каналом, в котором наблюдают образование кристаллов пикратов алкалоидов. В качественных химических реакциях, как правило, необходим контрольный опыт; г и с т о х и м и ч е с к и е р е а к ц и и: с помощью их определяют те или иные соединения непосредственно в местах локализации на срезах свежего или фиксированного материала. Результаты этих реакций наблюдают под микроскопом вначале при малом, а затем при большом увеличении. Условием проведения гистохимических реакции является их специфичность, потому в случае присутствия в исследуемом объекте других веществ, дающих подобные результаты реакции, их надо предварительно удалить. Наблюдать результаты реакции надо сразу после ее проведения, пока не произошла диффузия исследуемого вещества; х р о м а т о г р а ф и ч е с к и е м е т о д ы (в тонком слое сорбента − порошка окиси алюминия, силикагеля, агарозы или специальных сортов бумаги): позволяют не только обнаружить, но и определить качественный состав природных соединений, имеющих диагностическое значение для идентификации ЛРС. В настоящее время существуют различные методы хроматографии: твердослойная, газовая, газо-жидкостная, ионообменная, высокоэффективная и др. виды хроматографиического анализа.

Качественный химический анализ (фитохимический анализ) используется для качественного и количественного определения действующих веществ с помощью химических, физико-химических и других методов. Фитохимические методы используют часто для определения доброкачественности ЛРС. Для установления подлинности ЛРС используют: а) к а ч е с т в е н н ы е р е а к ц и и и б) х р о м а т о г р а ф и ю – деление на основные действующие и сопутствующие вещества, которые изложены в НД на данный вид ЛРС. Люминесцентный анализ: его основное достоинство – высокая чувствительность и специфичность. Биологические методы анализа ЛРС: обычно применяются при изучении сердечных гликозидов.

Методы определения подлинности ЛРС Подлинность цельного ЛРС устанавливают в основном после макроскопического анализа; измельченного, резано-прессованного, порошкового и брикетированного ЛРС – в результате микроскопического анализа, использования люминесцентного метода и гистохимических реакций.

Макроскопический анализ ЛРС – вид фармако-пейного анализа, используется для установления подлинности и доброкачественности ЛРС – главным образом ц е л ь н о г о, реже измельченного по методикам ГФ РБ и другим НД. Анализ включает определение: ▪ внешних признаков: формы (сравнительно с простейшей геометрической); ▪ цвета (определяется при дневном освещении – с поверхности и на изломе); ▪ запаха (при растирании ЛРС между пальцами, соскабливании, растирании в ступке); ▪ вкуса (неядовитого ЛРС – разжевывая и выплевывая); ▪ размеров ЛРС (длина, ширина, диаметр: для ЛРС размером более 3 см проводят 10– 15 измерений, для ЛРС размером менее 3 см – 20– 30 измерений) особенности (в зависимости от вида ЛРС). Можно сравнить, например, листья: ели, ландыша, крапивы, каштана, акации.

При макро- и микроскопическом анализе листа Листья рассматриваем сухими или размоченными в горячей). воде (прокипяченными в 2 % растворе Na. OH − для размягчения ткани и обесцвечивания хлорофилла). Определяем макро-строение листа (простой или сложный), обращаем внимание на строение черешка, геометрическую форму и толщину листовой пластинки, ее кутинизированность (кожистость), сравниваем структуру верхней и нижней стороны листа, опушенность. Цвет листов. пластинки (темно- или светло-зеленый, сизый, желтый, бурый, красноватый) устанавливаем при дневном освещении. Определяем морфологические особенности листовой пластинки (цельная, лопастная, раздельная, нитчатая, перисто-рассеченная), форму (в сравнении с прос-тейшей геометрической фигурой), характер ее края (гладкий, зубчатый, пильчатый, выемчатый, городчатый) и жилкования (оно особенно проявляется с нижней стороны листа: дуговое, линейное, сетчатое). Уточняем структуру поверхности (гладкая, морщинистая, опушенная), характер и степень развития опушения (преимущественно по жилкам), присутствие железок, воскового налета). В конце определяем запах и вкус.

Микроскопический – основной метод для определения подлинности и з м е л ь ч е н н о г о ЛРС: резаного, дробленого, порошкованного, резано-прессованного в брикеты и гранулы. Микроскопический анализ ЛРС основывается на знании анатомической структуры растений Заключается в том, чтобы в общей картине анатомического строения различных органов и тканей отыскать характерные диагностичес-кие признаки, которые отличают изучаемый объект от частей другого растения.

Микрокопический анализ листа начинают с э п и д е р м и с а: изучают форму эпидермальных клеток с верхней и нижней стороны листа (изодиаметрические или прозенхимные, прямоугольные, многоугольные, с извилистыми боковыми стенками, тонко- или толстостенные, с утолщениями стенок [четковидными или иными]); наличие трихомов − простых соско- и волосковидных или фигурных (одно- или многокле-точных, пучковых, звездчатых, Т-образных, головчатых, булавовидных, с розеткой клеток вокруг основания волоска или без нее); железок (простых булавовидных, 1 -, 2 — или 4 -клеточных, грибовидных с радиальным расположением секреторных клеток, свойственным сем. Губоцветных, либо овальных, подушковидных, с ярусным расположением выделительных клеток, свойственным сем. Астровых); устьиц (число, характер расположения): эпистоматическое – на верхней стороне листа, гипостаматическое – на нижней строне, амфистоматическое – на обеих сторонах листа, наличие на верхушке листа или зубчика водяных устьиц.

Устанавливают тип устьичного аппарата по числу и характеру расположе- ния вспомогательных клеток эпидермиса около замыкающих клеток устьиц: ● у двудольных: 1) диацитный устьичный аппарат: устьица окружены 2 околоустьичными клетками, смежные стенки которых перпендикулярны устьичной щели – характерен для растений семейств Губоцветные, Гвоздичные; 2) парацитный устьичный аппарат: с каждой стороны устьица вдоль его про-дольной оси расположены по одной или более околоустьичных клеток – это характерно для растений сем. Мареновые, Вересковые, Брусничные; 3) анизоцитный устьичный аппарат: устьица окружены тремя околоустьич-ными клетками, из них одна значительно меньше двух других– такой тип устьичного аппарата обнаруживается у растений семейства Капустные; 4) аномоцитный устьичный аппарат: устьица окружены неопределенным числом клеток, различающихся по форме и размерам – он встречается у растений сем. Лютиковые и у растений большинства других семейств; ● у однодольных и других растений: тетра- и мультиперигенный (тетра- и энциклоцитный).

Типы устьичного аппарата эпидермиса растений: 1 – диацитный, 2 – парацитный, 3 – анизоцитный, 4 – аномоцитный; 5 – тетрацитный, 6 – энциклоцитный; 7 – складчатость кутикулы.

Анализ трав Прежде всего обращают внимание на особенности строения стебля: прямой, искривленный или приподнимающийся, простой, ветвистый; характер ветвления; форму поперечного сечения (круглая, ребристая, 4 -гранная, полый цилиндр); цвет поверхности, опушение, размеры (диаметр у основания, длина); расположение листьев (у основания стебля, в середине и у вершины, черешковые, сидячие, стеблеобъем-лющие, с раструбами, очередное, супротивное, мутовчатое); тип соцветия (простой или сложный зонтик, кисть, колос, метелка); особенности морфологии и анатомии листьев, цветков, плодов. В измельченном и порошкованном сырье трав присутствуют фрагменты тканей стебля, а также цветков, листьев, плодов, семян. Микроскопический анализ трав основан на изучении микроскопии листьев, для чего отбирают кусочки их и анализируют, как описано выше.

М е х а н и ч е с к а я т к а н ь: клетки колленхимы на периферии листовой пластинки, сосуды ксилемы и флоэмы в проводящих пучках, иногда склереиды среди клеток листовой паренхимы. П р о в о д я щ а я т к а н ь: сосуды (трахеиды), лубяные волокна. П а р е н х и м а (м е з о ф и л л): губчатая, столбчатая, аэренхима, обкладочная (сосудистых пучков злаков с С 4 -типом фотосинтеза); наличие в клетках кристаллов, включений (игольчатые, призматические, рафиды, друзы, цистолиты – грозди, песок). Рафиды встречаются у Liliaceae , песок – у Belladonna , цистолиты – у Urtica , кристаллы и друзы – у Polygonum. З а п а с а ю щ а я т к а н ь − главным образом, паренхима: может запасать крахмал, белки, липиды. Иногда клетки паренхимы или их группы накапливают слизи, эфирные масла, смолы, стероиды, танниды. Впоследствии на их основе формируются вместилища, млечники, смоляные ходы. В ы д е л и т е л ь н а я т к а н ь: может быть представлена как эктофитными структурами (например, гидатодами, различными железками на эпидермальной поверхности, подкутикулярными вместилищами эфирных масел и смол), так и эндофитными образованиями (накопительными клетками, вместилищами, секреторными каналами).

Анализ цветков, плодов, семян Цветки. Устанавливают тип соцветия, опушенность его частей. Затем определяют строение околоцветника (простой чашечко- или венчиковидный либо двойной), венчика (актино- или зигоморфный, число и форму лепестков или зубчиков, их окраску), число и форму чашелистиков, число и строение тычинок, пестиков, строение завязи. При микроскопическом исследовании обращают внимание на строение эпидермиса внутренней и наружной сторон лепестков венчика и чашелистиков, наличие, характер расположения и строение волосков, железок, механических элементов, форму и размеры пыльцевых зерен и т. д. Плоды состоят из околоплодника (перикарпия) и заключенных в нем семян. Перикарпий может быть сухой (сухие плоды) или мясистый (сочные плоды). Диагностическое значение имеют форма и строение плода, его размеры (длина, ширина, поперечник), цвет, характер поверхности околоплодника, запах, вкус. Исследуют также число гнезд в плоде, наличие и число эфиромасличных канальцев, вместилищ. У сочных плодов после размачивания в горячей воде определяют строение околоплодника, количество, размер, форму, характер поверхности и цвет семян. При микродиагностике плодов важно строение перикарпия, в котором различают 3 слоя: экзо-, мезо- и эндокарпий, т. е. наружный, средний и внутренний. В экзокарпии обращают внимание на наличие и строение волосков; в мезокарпии – на расположение и структуру механических элементов, эфиромасличных канальцев и вместилищ, кристаллических включений; в эндокарпии – на положение клеток с четковидными утолщениями стенок, волокон механической ткани, склереид. Семена состоят из зародыша, эндосперма, семенной кожуры. Обращают внимание на форму, размеры, цвет, запах, вкус и общее строение семени. Диагностическое значение имеет расположение зародыша, наличие и форма рубчика. При изучении под микроскопом внимание обращают на строение семенной кожуры (слои клеток), величину и форму эндосперма, строение зародыша, на его механический слой, состоящий из вытянутых (прозенхимных) или изодиаметрических клеток с равномерно утолщенными стенками, а также на пигментный слой.

Анализ кор Внимание обращают на толщину, окраску, особенности строения наружной и внутренней поверхностей коры. Наружная поверхность коры обычно серого или коричневого цвета, гладкая или морщинистая, с характерными чечевичками и пятнами; внутренняя поверхность, как правило, светлее, гладкая или гофрированная; поверхность поперечного излома зернистая или занозисто-волокни-стая из-за механических элементов. Перед получением поперечных срезов кору в течение 1– 2 суток размачивают в смеси глицерина, спирта и воды (1: 1: 1). Поскольку кора ветвей и корневищ включает периферические слои клеток до камбия, в ней отсутствуют сосуды ксилемы (есть лишь волокна луба, часто связанные с кристаллоносными клетками). При микроскопировании обращают внимание на строение пробки, ее цвет, характер колленхимы, толщину первичной и вторичной коры, наличие феллодермы и особенности каменистых клеток, лубяных волокон, их скоплений или тяжей, а также кристаллов оксалата кальция, клеток с эфирными маслами, смолами, вместилищ и ходов, млечников.

Кора (схематическ. изображение): 1 – ядра, 2 – эпидерма, 3 – феллема, 4 – феллоген, 5 – феллодерма. 1 Корка (схематическ. изображение): 1 – слои пробки (феллемы), 4 – друзы, 2 – каменистые клетки (склереиды), 3 – остатки первичной коры. Каменистые клетки (склериеды)

Анализ корней, корневищ, клубней, луковиц У всех подземных органов определяют форму, особенности наружной поверхности (край может быть ровный или морщинистый, с продольным или поперечным рисунком складок, с рубцами от прикорневых листьев или буграми и точками – следами отмерших стеблей и корней) и излома (ровный, зернистый, волокнистый, занозистый, короткощетинистый и др.), цвет на поверхности и на изломе, размеры, запах, вкус. Клубни имеют стеблевое происхождение, формируются на концах подземных побегов (столонов), на поперечном срезе их видно пучковое строение. Поверхность клубня обычно морщинистая, ямчатая, бугристая. Луковицы состоят из утолщенных сочных чешуй, расположенных на укороченном стебле (донце), и нескольких сухих, покрывающих снаружи. Строение луковиц обычно рассматривают на продольном разрезе.

Корни по морфологическим признакам классифицируют на конические, стержневые и мочковатые, тонкие и толстые, длинные и короткие. Корни могут иметь первичное или вторичное анатомичес-кое строение. При п е р в и ч н о м строении в центре виден осевой цилиндр, в котором, прежде всего, обращает на себя внимание 2 -, 3 -, 4 -, 5 — или многолучевая структура, образованная сосудами ксилемы. Первичная анатомическая структура корней у однодольных сохраняется до конца жизни, а у двудольных она сменяется в т о р и ч н о й структурой, когда радиальное расположение проводящих тканей становится не столь отчетливым и сменяется коллатеральным, при котором основное пространство в центре составляет древесина. Покрывающие снаружи центральный цилиндр слои ризодермы, первичной коры и эндодермы слущиваются и в результате активности перицикла заменяются вторичной корой, содержащей наружный слой пробки, очень тонкий слой феллогена, феллодерму, в которой могут встречаться каменистые клетки, волокна луба, друзы, а у некоторых видов – также секреторные вместилища и каналы.

Корневища – простые и разветвленные, толстые и тонкие. У 1 -дольных растений корневища имеют т о л ь к о п у ч к о в о е строение: пучки (закрытого типа, без камбия − его активность рано заканчиваетс я) беспорядоч-но располагаются в коре и центральном цилиндре. У 2 — дольных корневища могут иметь как п у ч к о в о е строение (пучки открытого типа, коллатеральные или биколлатеральные, располагаются в виде кольца у поверхности корневища, а в центре – широкая паренхимная сердцевина), так и б е с п у ч к о в о е, при котором площадь поперечного среза заполнена одревесневшими элементами, чередующимися с лучами паренхимы, выходящими из центра (иногда сердцевинная паренхима разрушается и образуется центральная полость).

Анатомическая структура (схема – поперечный срез) корня (А. Б): первичное строение (А: 1 – эпидермис, 2 – первичная кора, 3 – эндодерма, 4 — перицикл, 5 – флоэма, 6 — ксилема) и вторичное (Б: 1 – перидерма, 2 – кора, 3 – камбий, 4 – древесина, 5 – луч сердцевинной паренхимы) и корневища (В. Г, Д) 1 -дольных растений (В: 1 – покровная ткань, 2 – кора, 3 – эндодерма, 4 – центральный цилиндр, 5 – проводящие пучки) и 2 -дольных растений с пучковым типом строения (Г: 1 – перидерма, 2 – кора, 3 – сердцевина, 4 – проводящие пучки, а – флоэма, б – ксилема) и беспучковым типом строения (Д: 1 – перидерма, 2 – кора, 3 – камбий, 4 – древесина, 5 – сердцевина, 6 – сердцевинные лучи). А Г Д Д В ДВ Б

ПРОТОКОЛ №___ от ________ 200_ г. ТОВАРОВЕДЧЕСКОГО АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ ____________________________________________ (латинское название сырья, растения, семейства) // (ГФ РБ, ФС № , ГОСТ или др. НД) Количество единиц продукции сырья _________________ Результат осмотра упаковки (нарушена, не нарушена) __________ Результат проверки однородности партии (однородная, не однородная) ______ Количество единиц продукции сырья для вскрытия (объем выборки) ____ Масса средней пробы _________________________ Масса аналитической пробы для определения: 1. Степени зараженности амбарными вредителями _________ 2. Подлинности, измельченности и содержания примесей ______ 3. Влажности _________________________ 4. Содержания золы и действующих веществ ____________ 5. Микробного заражения ____________________ 6. Радиационного контроля ___________________ Результаты анализа: Степень зараженности амбарными вредителями ______________ Числовые показатели Найдено НД, % г % Содержание измельченных частиц* Содержание частей сырья, утративших нормальную окраску (почерневших, побуревших, выцветших)* Другие части этого растения, не соответствующие установленному описанию* Органическая примесь ______ Минеральная примесь ______ Влажность Зола общая Зола, не растворимая в 10% растворе HCl Экстрактивные вещества (извлекаемые водой, спиртом)* Действующие вещества (наименование)* Микробное заражение* Радиационный контроль* Загрязненность тяжелыми металлами* Загрязненность пестицидами, гербицидами и другими ксенобиотиками органической природы* * Если требует НД. З А К Л Ю Ч Е Н И Е ___________________________ сырье (не) соответствует требованиям НД Подпись аналитика _____________________________

ПРОТОКОЛ №___ от ________ 200_ г. МОРФОЛОГО-АНАТОМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ ______________________________ (латинское название сырья, растения, семейства) // НД I. Внешние признаки ___________________________ (дать описание внешних признаков сырья определенной морфологической группы по схеме) II. Микроскопические признаки _ ______________________ [Место для рисунка] (подписать детали рисунка, выделить диагностические признаки) III. Микрохимические реакции _______________________ (реакции, используемые в диагностике сырья и их результаты) ЗАКЛЮЧЕНИЕ _____________________________ сырье (не) соответствует требованиям НД Подпись аналитика ____________________________

ПРОТОКОЛ №___ от ________ 200_ г. ФИТОХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ __________________________________ (латинское название сырья, растения, семейства) // НД I. Выделение веществ(а) из растительного сырья _______________________________________________________ (краткая методика) II. Качественный анализ _ ___________________________ (описание качественных реакций и их результат, химизм реакций) III. Хроматографическое исследование _____________________ (сорбент, подвижная фаза, проявление, результат) IV. Количественный анализ __________________________ (краткая методика, расчеты, результат) ЗАКЛЮЧЕНИЕ _______________________________ (результаты II, III и IV исследований и соответствие сырья НД) Подпись аналитика _____________________________

С П А С И Б О З А В Н И М А Н И Е!

ЛРС и получаемые из него продукты могут быть представлены на рынке как товар, если они по всем параметрам соответствуют НД, действующим в настоящее время в Беларуси. Чтобы определить данное соответствие, проводят фармакогностический анализ ЛРС (рис. 3), для осуществления которого необходимо:

• * знать действующие НД и их новейшие изменения;
• * уметь выполнять фармакогностический анализ.

Система государственного контроля осуществляет проверку качества ЛРС на соответствие требованиям НД на аптечных складах (базах), фармацевтических фабриках, предприятиях, занимающихся выращиванием ЛРС, переработкой и поставкой его или готовых ЛС на фармацевтический рынок Беларуси.

При отправке ЛРС на другие аптечные склады (базы), фабрики и предприятия каждая партия сопровождается заверенной копией протокола анализа, удостоверяющей качество партии, и при поступлении на другие склады ЛРС повторному анализу не подвергается, за исключением случаев, когда возникают сомнения в его качестве.

Фармакогностический анализ -- это комплекс методов анализа ЛРС, сырья животного происхождения и их продуктов, устанавливающий их подлинность и доброкачественность по всем параметрам НД.

Подлинность (идентичность) -- соответствие исследуемого объекта тому наименованию, под которым оно поступило для анализа. Подлинность исследуемого ЛРС устанавливается путем следующих анализов:

• * макроскопического;
• * микроскопического;
• * качественного химического (качественные реакции);
• * люминесцентного.

Во всех случаях проводятся первый и второй виды анализа, третий и четвертый выполняются реже.

Доброкачественность -- соответствие ЛРС требованиям НД. Доброкачественность ЛРС определяется исходя из его чистоты, степени измельчения (цельного ЛРС), влажности, содержания золы, действующих веществ.

Рис. 1.

Фармакогностический анализ ЛРС включает ряд последовательных анализов (рис. 1): товароведческий, макроскопический, микроскопический, фитохимический. В некоторых случаях дополнительно определяется биологическая активность ЛРС. Товароведческому анализу подвергают все ЛРС, поступающее от различных заготовителей. Результаты анализов регистрируются в журнале.

Прием ЛРС оформляется приемной квитанцией. Товароведческий анализ в большинстве случаев не требует сложного оборудования и выполняется на приемных пунктах, складах, базах. Он состоит из трех этапов:

• * приемка сырья;
• * отбор проб;
• * испытания с помощью ряда методов.

ЛРС принимают мелкими и крупными партиями. В аптеки ЛРС поступает мелкими партиями по несколько килограммов в одной упаковке или в расфасованном виде. На склады поступают крупные партии ЛРС.

Партией считается ЛРС одного наименования массой не менее 50 кг, однородного по всем показателям и оформленного одним документом. В этом документе содержатся данные: номер и дата выдачи, наименование и адрес отправителя, наименование ЛРС; номер партии, масса, год и месяц сбора, место заготовки, результаты испытаний о качестве ЛРС, обозначение НД на ЛРС, ФИО и подпись лица, ответственного за качество ЛРС.

Единицами продукции (товара) являются кипы, ящики, мешки, баулы и т. д. Каждую единицу товара вначале подвергают внешнему осмотру для установления соответствия упаковки и маркировки НД. Внимание обращают на состояние тары (отсутствие повреждений, подмока- ния, гнили).

Так как все единицы партии товара проверить сложно, делают выборку: в партии из 1--5 единиц продукции анализируются все единицы, в партии из 6--50 единиц анализу подвергаются 5 единиц, находящихся вверху, в середине и внизу товарной партии, а в партии из более чем 50 единиц для анализа отбирается из разных мест партии 10 % единиц продукции, причем числа от 1 до 5 приравниваются к 10 единицам (например, в 51 единице товара объем анализируемой выборки будет 6 единиц). Качество ЛРС в поврежденных единицах партии проверяют отдельно от неповрежденных, вскрывая каждую единицу.

Попавшие в выборку единицы продукции вскрывают и при внешнем осмотре определяют однородность ЛРС по способу подготовки (цельное, измельченное, прессованное и т. д.), цвету, запаху, засоренности; по наличию плесени, гнили, устойчивого постороннего запаха, не исчезающего при проветривании; по засоренности ядовитыми растениями и примесями (камни, стекло, сучья, перья, помет грызунов и птиц); на глаз и с помощью 10-кратной лупы определяют наличие амбарных вредителей.

В случае если при внешнем осмотре установлено, что ЛРС неоднородно, присутствует плесень и гниль, засоренность посторонними растениями в количестве, превышающем допустимые нормы, вся партия должна быть рассортирована и вторично предъявлена к сдаче. При обнаружении затхлого, устойчивого запаха, несвойственного данному виду ЛРС, а также ядовитых растений и посторонних примесей (стекло, помет грызунов, птиц и т. д.), зараженности амбарными вредителями II и III степеней партия бракуется, и ЛРС не подлежит приемке.

Отобранные для проверки единицы продукции соединяют в объединенную пробу, из которой методом квартования выделяют (в соответствии с нормативными требованиями ГФ РБ) среднюю и аналитические пробы.

Как правило, аналитические пробы для определения подлинности сырья, измельченности и содержания примесей, его зараженности амбарными вредителями, а также на радиационный контроль и микробиологическую чистоту берутся непосредственно из объединенной пробы; все другие аналитические пробы (для определения содержания в сырье влаги, золы, действующих биологически активных веществ, присутствия пестицидов, токсинов, а иногда -- генно-модифицированного сырья) берутся из средней пробы. Правила отбора и методы исследования аналитических проб излагаются в ГФ РБ, т. 1 (раздел 2.8 и др.).

Для установления степени зараженности ЛРС амбарными вредителями (см. рис. 1) соответствующую аналитическую пробу сырья помещают на сито с отверстиями диаметром 0,5 мм и просеивают. В прошедшем сквозь сито сырье установленное количество вредителей и их личинок пересчитывают на 1 кг сырья. При наличии в 1 кг ЛРС не более 20 клещей и/или 5 хлебных точильщиков, амбарной моли и ее личинок зараженность относят к I степени; при наличии более 20 свободно передвигающихся клещей и/или 6--10 хлебных точильщиков либо амбарной моли -- ко II степени; при наличии более 20 клещей и/или более 10 хлебных точильщиков либо личинок амбарной моли -- к III степени.

ЛРС и получаемые из него продукты могут быть выставлены на рынок как товар, если они по всем параметрам соответствуют НД. Это соответствие устанавливают в результате фармакогностического анализа ЛРС.

Фармакогностический анализ – это комплекс методов анализа ЛРС, сырья животного происхождения и их продуктов, устанавливающий его подлинность и доброкачественность по всем параметрам НД.

Подлинность (идентичность) – соответствие исследуемого объекта тому наименованию, под которым оно поступило для анализа. Подлинность (идентичность) исследуемого ЛРС устанавливается путем: 1) макроскопического анализа; 2) микроскопического анализа; 3) качественного химического анализа (качественные реакции); 4) люминесцентного анализа ; (во всех случаях проводятся анализы 1 и 2, анализы 3 и 4 выполняются реже).

Доброкачественность

Фармакогностический анализ ЛРС складывается из ряда последовательных анализов (рис. 3): товароведческого, макроскопического, микроскопического, фитохимического ; в некоторых случаях он дополняется определением биологической активности ЛРС .

В аптеки ЛРС поступает мелкими партиями по несколько кг в одной упаковки или в расфасованном виде. На склады поступают крупные партии.

Партией считается ЛРС одного наименования массой не менее 50 кг, однородного по всем показателям и оформленного одним документом. Единицами продукции являются кипы, ящики, мешки, баулы.. Каждую единицу товара вначале подвергают внешнему осмотру для установления соответствия упаковки и маркировки НД.

Так как все единицы партии товара проверить сложно, делают выборку : в партии до 5 единиц оцениваются все, из 6-50 – 5 единиц, находящихся вверху, в середине и внизу товарной партии, более 50 –из разных мест 10% единиц продукции.

В случае неудачного осмотра вся партия должна быть рассортирована и вторично предъявлена к сдаче. Также в случае более серьезных проблем вся партия бракуется, и ЛРС не подлежит приемке.

Отобранные для проверки единицы продукции соединяют в объединенную пробу , из которой методом квартования выделяют среднюю и аналитическую пробы

Объединенная : подлинность сырья, измельченность, содержание примесей, зараженность амбарными вредителями, радиационный контроль.

Средняя : содержание влаги, золы, действующих БАВ, присутствие пестицидов, токсинов

6. Методы определения подлинности ЛРС. Методы определения доброкачественности ЛРС.

Подлинность (идентичность) – соответствие исследуемого объекта тому наименованию, под которым оно поступило для анализа. Подлинность (идентичность) исследуемого ЛРС устанавливается путем:

1) макроскопического анализа;

2) микроскопического анализа;

3) качественного химического анализа (качественные реакции);

4) люминесцентного анализа;

(во всех случаях проводятся анализы 1 и 2, анализы 3 и 4 выполняются реже).

Доброкачественность – соответствие ЛРС требованиям НД. Доброкачественность ЛРС определяется чистотой ЛРС, степенью измельчения (цельного ЛРС), влажностью, содержанием золы и действующих веществ.

Методы определения подлинности ЛРС . Подлинность цельного ЛРС устанавливают в основном на основании макроскопического анализа; измельченного, резано-прессованного, порошкового и брикетированного ЛРС – в результате микроскопического анализа, а также использования люминесцентного метода и гистохимических реакций.

Макроскопический анализ : методики включают определения:

1) внешних признаков , – в частности, формы (сравнительно с простейшей геометрической);

2) цвета (определяется при дневном освещении – с поверхности и на изломе);

3) запаха (при растирании ЛРС между пальцами, соскабливании, растирании в ступке);

4) вкуса (неядовитого ЛРС, с разжевыванием и выплевыванием);

5) размеров ЛРС (длины, ширины, диаметра)

Микроскопический анализ. Основывается на глубоком знании анатомической структуры растений и заключается в том, чтобы в общей картине анатомического строения различных органов и тканей отыскать характерные диагностические признаки, по которым изучаемый объект можно отличить от анатомических частей другого растения.

Качественный химический анализ (фитохимический анализ) – используется для качественного и количественного определения действующих веществ

а) Качественные хим реакции , готовят водные или водно-спиртовые извлечения из исследуемого сырья. Эффект наблюдают при добавлении соответствующего реактива

б) Микрохимические реакции ведут одновременно с микроскопическим анализом ЛРС, наблюдая результаты невооруженным глазом и под микроскопом:

в) Гистохимические реакции –определяют соединения в местах их локализации, то есть на срезах свежего или фиксированного материала. Результаты наблюдают под микроскопом при малом и большом увеличениях. Условие проведения - специфичность , Наблюдать результаты реакции надо сразу (диффузия в-ва)

г) Хроматографические методы (в тонком слое сорбента или на бумаге) значение при идентификации определенных видов ЛРС.

Люминесцентный анализ имеет основное достоинство: высокую чувствительность и специфичность; метод можно применять и для изучения толстых непрозрачных срезов сухого ЛРС.

Биологические методы ЛРС: обычно применяются при изучении сердечных гликозидов.

Применение методов биотехнологии в фармакогнозии. Основные лекарственные формы и их приготовление из ЛРС. Примеры лекарственных средств растительного происхождения (ЛСРП).

Клеточная селекция − одна из наиболее перспективных кл технологий для создания сортов не только важнейших сельхоз, но и лек растений. С большим ускорением развиваются работы по созданию высокопродуктивных штаммов и регенерантов методам и гибридизации соматических кл слиянием протопластов и генной инженерии.

В зависимости от условий клетки в культуре in vitro могут делиться анархически, образуя неорганизованную каллусную массу , либо менять программу своего поведения и делиться организованно с образованием зачатков корней, стеблей, зародышей . Из этих зачатков растений в культуре in vitro затем можно регенерировать растения.

Легче всего вызвать морфогенез используя зародыши и почки, стеблевые меристемы, но для этого нужны очень богатые питательные среды. Растения-регенеранты затем адаптируются к почвенным условиям и переводятся в обычную агрокультуру. Сейчас – это основное направление в биотехнологии сельхоз и ЛР.

Технологии клонального микроразмножения − важное дополнение к традиционной селекции растений. Можно быстро размножить уникальный генотип или новый сорт. Таким образом, основой биотехнологического использования культур тканей рас­тений в фармакогнозии является способность клеток in vitro синтезировать самые разнообразные группы веществ: многочисленные фенольные соедине­ния, гликозиды, эфирные масла, каротиноиды, смолы, алкалоиды и другие природные соединения. Все они участвуют в обмене в-в растений и выполняют определенные, часто весьма существенные, функции,